組織胍溶液

組織胍溶液公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-POFUT2 Antibody小鼠內(nèi)皮脂肪酶
Anti-POLA1 Antibody大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原
Anti-Pogz Antibody大鼠凝血因子IX
Anti-POLB Antibody小鼠碳酸酐酶
Anti-POLB Antibody人P53
Anti-POLD1 Antibody人周期素D3
Anti-POLD3 Antibody大鼠凝血因子

產(chǎn)品分類：核酸提取

儲(chǔ)存條件：室溫,6個(gè)月

用途：由組織胍和DEPC水組成。

注意事項(xiàng)：避免RNA污染。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

根瘤菌屬λ輕鏈抗體Human PDRG1 ELISA Kit透明質(zhì)結(jié)合蛋白2(HABP2)

糞產(chǎn)堿菌糞亞種溶體相關(guān)膜蛋白2抗體Human PDS5A ELISA Kit透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)

異常畢赤酵母肺腺瘤易感蛋白2抗體Human PDE6A ELISA Kit透明質(zhì)蛋白聚糖連結(jié)蛋白1(HAPLN1)

大腸埃希氏菌磷化RNA聚合相關(guān)蛋白LEO1抗體Human PDCD5 ELISA Kit透明質(zhì)(HA)

氣生馬賽菌腫瘤抑制基因LATS2抗體Human PDE6B ELISA Kit銅鋅-過氧化物岐化(SOD1)

褐橙指孢囊菌磷化白F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human PXDN(Peroxidasin homolog) ELISA Kit銅藍(lán)蛋白(CP/CER)

鴨疫里氏桿菌磷化腫瘤抑制基因LATS2抗體Human PDCD6 ELISA Kit同源框A3(HOXA3)

灰色鏈霉菌磷化白F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human PDCD6IP ELISA Kit同型半胱(Hcy)

膠凍樣芽胞桿菌白F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human PDCL ELISA Kit鐵調(diào)25(Hepc25)

沙福芽孢桿菌亮鏈轉(zhuǎn)錄因子樣1抗體Human PDCD7 ELISA Kit鐵調(diào)(Hepc)

海小單孢菌層粘連蛋白B2γ1抗體Human PDK3 ELISA Kit鐵-過氧化物岐化(Fe-SOD)

阿氏芽孢桿菌磷化T活化連接蛋白抗體Human PDLIM3 ELISA Kit鐵蛋白重鏈(FTH)

木荷生德克斯酵母磷化T活化連接蛋白抗體Human PDLIM5 ELISA Kit鐵蛋白(Ferritin)

黃曲霉低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體Human PDLIM7 ELISA Kit鐵蛋白(FE)

?？曝愄厥暇字；D(zhuǎn)移2抗體Human PDP2 ELISA Kit調(diào)寧蛋白1(CNN1)

孔雀石綠鏈霉菌LRRFIP2蛋白抗體Human PDRG1 ELISA Kit天青殺/肝結(jié)合蛋白(AZU/HBP)

細(xì)黃鏈霉菌Streptomyces│microflavus 質(zhì)量規(guī)格：>85.0%(E)人參二

鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>75.0%(HPLC)(T)原人參三

橄欖色盾殼霉Coniothyrium│olivaceum Bonord. 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)原人參二
組織胍溶液GP2(Mouse glucoprotein 2)ELISA Kit  小鼠抗核膜糖蛋白2規(guī)格： 48T

IL-7(Mouse Interleukin-7) ELISA kit  小鼠白介su7規(guī)格： 48T

MT(Mouse Melatonin) ELISA Kit  小鼠褪黑su規(guī)格： 48T

Apo-H(Mouse Apolipoprotein H) ELISA Kit  小鼠載脂蛋白H規(guī)格： 48T

HSF1(Mouse Heat Shock Factor 1) ELISA Kit  小鼠熱休克因子1規(guī)格： 48T