詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 銜接蛋白α-Adaptin抗體 |
英文名稱 | alpha Adaptin |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
地平相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
青標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Penicillin G Potassium
馬來那敏標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Chlorpheniramine Maleate
馬來那敏緩釋標準品(藥物釋放校正)
規(guī)格:60tables 英文名稱:
加壓素標準品 規(guī)格:1.78mg 英文名稱:
奧比沙星標準品 規(guī)格:350mg 英文名稱:Orbifloxacin
阿魏標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
鹽咪嗪標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Imipramine Hydrochloride
芬標準品 規(guī)格:350mg 英文名稱:Baclofen
維諾標準品 規(guī)格:0.7ml 英文名稱:Ethchlorvyl CIV
卡波樹脂 進口、國產(chǎn) PolyacrylicresinⅢ 含量:AR,98%
卡芥 進口、國產(chǎn) BCNU 含量:親合層析純,1.95ug/ml
卡爾費休試劑(含) 進口、國產(chǎn) KarlFlscherreagent 含量:BR,94%
卡拉膠類型III 進口、國產(chǎn) KCarrageenanKarraType 含量:AR,98%
卡拉膠類型V 進口、國產(chǎn) ICarrageenanIOTAType 含量:BR,98%
卡氏試液 進口、國產(chǎn) KarlFlscherreagent 含量:CP,99%
抗壞血 進口、國產(chǎn) VC 含量:顯色劑,80%
抗菌素 進口、國產(chǎn) Zeocin 含量:USP級,9001050mcg/mg
抗痛素 進口、國產(chǎn) Antipaindihydrochloride 含量:生物技術(shù)級,600u/mg
鈧氧 進口、國產(chǎn) Scandiumoxide 含量:BR,98%
銜接蛋白α-Adaptin抗體Cyt-C 檢測試劑盒 細胞色素C* 規(guī)格: 48T/96T
cytb561(Human lipocalin 2) 檢測試劑盒 細胞色素b561* 規(guī)格: 48T/96T
CYT Ab(Human Cysticercosis antybody) 檢測試劑盒 囊蟲病抗體* 規(guī)格: 48T/96T
CysLTs(Human cysteinyl leukotrienes) 檢測試劑盒 半胱氨酰白三烯* 規(guī)格: 48T/96T
Cys-C(Mouse Cystatin C) 檢測試劑盒 半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C* 規(guī)格: 48T/96T
Cys-C(Human Cystatin C) 檢測試劑盒 半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C* 規(guī)格: 48T/96T
Cys-C 檢測試劑盒 半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C* 規(guī)格: 48T/96T