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海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測(cè)試盒100管/96樣

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更新時(shí)間:2022-06-17 16:46:58瀏覽次數(shù):291

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號(hào) AS6321229 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 檢測(cè)方法 微量法
海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測(cè)試盒100管/96樣公司正在出售的產(chǎn)品:低密度脂蛋白受體5樣蛋白抗體CD46/MCP(membrane cofactor protein)rat, mouse 膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗原
富含亮重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白3抗體CD5 CD5 多肽抗原
扁豆凝集ICAM-2/CD102(intercellular adhesion molecules-2) 間粘

詳細(xì)介紹

商品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測(cè)試盒100管/96樣

檢測(cè)方法

微量法

產(chǎn)品規(guī)格

100管/96樣

產(chǎn)品貨號(hào)

AS6321229

商品介紹:

測(cè)定意義:

海藻糖是由兩個(gè)葡萄糖分子以α,α-1-1 糖苷鍵連接而成的一種非還原雙糖,廣泛存

在于細(xì)菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆蟲(chóng)、無(wú)脊椎動(dòng)物和高等植物等多種有機(jī)體中。海藻糖的非還原性決定了它對(duì)酸、堿、高溫等的穩(wěn)定性。另外,它本身具有很強(qiáng)的吸水性,使它在生物體內(nèi)具有抗脫水作用,在逆境條件下可通過(guò)識(shí)別外界刺激、產(chǎn)生和傳遞信號(hào)、基因表達(dá)和代謝調(diào)節(jié)來(lái)保護(hù)植物免受不良環(huán)境的傷害。

植物體內(nèi)主要以葡萄糖為底物合成海藻糖,該反應(yīng)首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)的作用下,催化尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和 6-磷酸葡萄糖反應(yīng)生成中間產(chǎn)物6-磷酸海藻糖,再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶 (trehalose 6-phosphate phosphatase,TPP)的作用下去磷酸化,生成海藻糖。因此,測(cè)定TPS活性對(duì)于研究植物逆境具有重要意義。

測(cè)定原理:

TPS催化UDPG與G6P生成海藻糖-6-磷酸,同時(shí)產(chǎn)生UDP;UDP在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下,氧化NADH為NAD+,NADH的下降速率與UDP含量成正比,通過(guò)340nm吸光度下降速率反映TPS活性。

需自備的儀器和用品:

酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。

自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

NAD+和NADH的提?。?/span>

1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取

NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、組織中NAD+和NADH的提取:

NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,

混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取:

NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性

提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿

性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

ADH測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。

3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。

4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。

注意:空白管只需測(cè)定一次。

注意事項(xiàng):

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。

甘草單鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Deoxyshikonin離子通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝1g

甘草二鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tariquidar,XR-9576高分子量激肽原重鏈抗體包裝250mg

甘草異黃A英文名: Titan yellow通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體包裝25g

甘木通(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: SasapyrineKelch樣蛋白26抗體包裝5g

甘青青蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sasapyrine賴(lài),天冬,谷,亮相關(guān)序列抗體包裝25g

甘松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Lurasidone HClKelch樣蛋白10抗體包裝5g

甘遂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Lurasidone HClKelch樣蛋白11抗體包裝25MG

甘西鼠尾草英文名: PrunetinKelch樣蛋白3抗體包裝100g

甘油三油酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Aromadendrin(Dihydrokaempferol)Kelch樣蛋白14抗體包裝25g

苷松新(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 3',4',7-TrihydroxyflavoneKelch樣蛋白31抗體包裝5g

橄欖苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: DiclazurilKelch樣蛋白32抗體包裝1g

崗梅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Metacycline HCl;Methacycline HCl電壓閥門(mén)通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體包裝250mg

崗松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Metacycline HCl;Methacycline HClTGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗體包裝5g

杠柳次苷英文名: Adipic dihydrazide離子通道蛋白Kv1.3抗體包裝25g

杠柳苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Linolenic acid磷化KLF5抗體包裝5g

百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗胰島受體抗體試劑盒告達(dá)庭;Caudatin

ATCC05595=DSM7136資源名稱(chēng): 施氏假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗試劑盒鬼臼-4-O-葡萄糖苷;Podoph

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:含量:Imipenem≥400μg/mg,Cilastatin(C16H26N2O5S) ≥400μg/mg,USP36抗眼肌抗體試劑盒高黃芩;Sculartln
海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測(cè)試盒100管/96樣熒光假單胞 4-(6-氨基-3-吡啶基)哌-1-甲酸叔丁酯氨甲基轉(zhuǎn)移Elisa

蘑菇輪枝孢 3,6-二咔唑1-脫氧木酮糖-5-磷酸合成Elisa

大腸埃希氏 6-乙酰氨基己酸牻牛兒基焦磷酸合Elisa

弗雷德里克斯堡假單胞 6-乙酰氨基己酸1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸還原異構(gòu)Elisa

棲稻假單胞 5-溴-2--4-甲氧基嘧啶4-羥基-3-甲丁-2-烯基二磷酸還原Elisa

白僵 聚六亞甲基胍鹽酸鹽,~25%水溶液谷合成Elisa

好食脈孢 1-乙?;姚?2脂肪酸脫氫Elisa

厚垣普奇尼亞* 3,5-二溴苯甲玉米赤霉烯酮Elisa

卷枝毛霉原變型 3-溴-5-脫氧雪腐鐮孢烯Elisa

谷棒桿 N-2-[(4-1H-咪唑基)乙基]-3-氨基酰核糖核酸Elisa

黃柄曲霉 2-二甲基氨吡啶多巴色互變Elisa

根瘤 (S)-3-羥基丁酸乙酯DHICA氧化Elisa

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 4-甲酰氨基-N-乙酰乙酰苯內(nèi)皮Elisa

云芝 2,5-二并惡唑異戊烯基焦磷酸異構(gòu)Elisa

中生根瘤 5-氨基-2-氟β-香樹(shù)合成Elisa

 


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