詳細(xì)介紹
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義 果糖1,6-二磷酸是機(jī)體內(nèi)的高能代謝物和代謝調(diào)控劑,是糖酵解途徑的重要中間體,廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi),能影響細(xì)胞內(nèi)鉀離子的濃度,改善葡萄糖和其他能量底物的代謝,促進(jìn)組織氧的釋放,廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)藥制劑。 測(cè)定原理 醛縮酶催化果糖1,6-二磷酸降解,產(chǎn)物與DNPH縮合成紫紅色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
可見分光光度法 | 50管/48樣 | AS6321167 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
金松雙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Benzyl acetateG蛋白偶聯(lián)受體18抗體包裝5g
金鐵鎖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Bensulfuron-methylG蛋白偶聯(lián)受體65抗體包裝100ml
金銀花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Benazolin-ethyl ester生長(zhǎng)終止特異性同源盒基因抗體包裝500ml
金櫻根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 3,4-Benzopyrene谷受體2抗體包裝100g
金櫻子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: (±)-1,3-Butanediol谷受體3抗體包裝25g
金盞銀盤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Butachlor solution谷受體4抗體包裝500g
筋骨草甾C英文名: Butachlor促代謝型谷受體1抗體包裝1g
錦燈籠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Butachlor solution甘受體α4抗體包裝250mg
京大戟(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Butachlor solution生長(zhǎng)分化因子8抗體包裝50mg
京尼平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Buturon磷化糖原合激-3β抗體包裝1g
京尼平甙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Bromopropylate solutionGlu-Glu tag抗體包裝25g
京尼平苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Bromopropylate solution胰高血糖樣肽-2抗體包裝5g
荊芥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Bronopol甘受體alpha 1/2/3型抗體包裝250mg
荊芥穗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Benfluralin抑制型G蛋白α3抗體包裝25g
九里香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Benzo(k)fluoranthene促性腺激釋放激受體抗體包裝5g
腐皮鐮孢Fusarium│solani 質(zhì)量規(guī)格:>98%,培養(yǎng)級(jí)趨化因子配體17試劑盒?;蛆Z去氧膽 ;Taurochenod
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR趨化因子26試劑盒牛血清白蛋白;Bovine albumi
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;?/span>Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品趨化因子2試劑盒耐斯糖;Nystose
果糖1,6二磷酸(FDP)測(cè)試盒50管/48樣膠胞 3-喹啉成纖維生長(zhǎng)因子4Elisa
濃鏈霉 4,4′-雙[(4-溴苯基)苯氨基]聯(lián)苯突觸標(biāo)記蛋白7Elisa
細(xì)黃鏈霉 2-甲氧基-5-磺酰甲酯熱穩(wěn)定抗原Elisa
水生鞘氨單胞 Tris(dimethylphenylphosphine)](2,5-norbornadiene)r二十二碳六烯酸Elisa
球孢白僵 1,1-聯(lián)苯-4-基-1-丁鹽酸鹽抗類固生成抗體Elisa
鏈霉 2,3-二苯乙全轉(zhuǎn)運(yùn)谷Elisa
米曲霉 2,5-二基溴化鎂 (1M THF溶液)C-C趨化因子受體6Elisa
水生屈曲桿 N6-苯甲?;?脫氧腺苷白酯Elisa
大孢子鏈霉 十乙二單甲15s-羥化二十碳四烯酸Elisa
Winogradskyella damuponensis 1H-吡咯并(2,3-d)嘧啶幾丁質(zhì)1Elisa
茶云紋葉枯病 4-苯甲?;剿崂w維蛋白原βElisa
輪枝(大豆胞囊線蟲卵寄生真) 烯鎂β抑制蛋白1Elisa
粘蓋牛肝* 直接紅80維甲酸誘導(dǎo)基因1蛋白Elisa
巴斯德畢赤酵母 9-苯基-9-芴病誘導(dǎo)信號(hào)適配蛋白Elisa
釀酒酵母 Thionin perchlorateB-κ-輕肽基因增強(qiáng)子抑制因子激βElisa