SDS-PAGE濃縮膠緩沖液

SDS-PAGE濃縮膠緩沖液公司正在銷售的產品：Anti-TUBGCP6 Antibody大鼠骨成型蛋白2
Anti-TUBGCP6 Antibody人高敏狀腺原
Anti-TUFM Antibody大鼠心臟脂肪酸結合蛋白
Anti-TUSC3 Antibody大鼠膽囊收縮素/縮膽囊素八肽
Anti-TUFM Antibody大鼠環(huán)加氧酶2
Anti-TUSC2 Antibody大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)

產品分類：蛋白電泳

儲存條件：室溫,12個月

用途：配制SDS-PAGE濃縮膠

注意事項：含TRIS-HCl（pH6.8）和0.4%SDS,配制使無需添加SDS溶液

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

副結核補體結合試驗抗原蛋白S抗體Anti-CD73/Nt5e Antibody3-羥基-3-甲基戊二酰合1(HMGCS1)

球孢白僵菌多瘤病增強了結合蛋白２β抗體Anti-CD74 Antibody3-葡萄糖苷孕二(PdG)

芽孢桿菌屬磷二酯4D抗體Anti-CD79A Antibody28S抗核糖體抗體(28S rRNP)

木木霉前纖維蛋白2抗體Anti-CD79B Antibody(PB0117)26S蛋白體ATP調節(jié)亞基11(PSMD11)

絨邊乳菇脯酰羧肽抗體Anti-CD8 Alpha/Cd8a Antibody26S蛋白體(26S PSM)

絳紅產色小單胞菌P2Y4受體抗體Anti-CD8 alpha/Cd8a Antibody25羥基維生D3(25(OH)D3/25 HVD3)

乳乳球菌乳亞種瘤促活化因子3抗體Anti-CD81 Antibody25羥基維生D3(25 HVD3)

枯斑擬盤多毛孢磷脂酰乙結合蛋白1抗體Anti-CD80 Antibody25羥基維生D2(25 HVD2)

石蕊殺菌鏈霉菌外周蛋白抗體Anti-CD79A Antibody(PB0116)20S蛋白體(20SP)

日本裂殖酵母人前列腺特異性抗原單克抗體(包被)Anti-CD80 Antibody2，3-二磷甘油(2，3-DPG)

尖角凸臍蠕孢鼠抗人前列腺特異性抗原單克抗體(檢測)Anti-CD81 Antibody2，3－二磷甘油(2,3-DPG)

真姬菇抑制/腫瘤抑制因子抗體Anti-CD81 Antibody2,3-二磷甘油(2,3-DPG)

總狀共頭霉脂蛋白磷脂A2抗體Anti-CD81 Antibody2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)

球形芽孢桿菌重組蛋白A抗體Anti-CD86 Antibody2 型次核苷脫氫(IMPDH)(IMPDH2)

固氮菌雌激受體共調節(jié)因子抗體Anti-CD82 Antibody1型1-磷鞘受體(S1P1)

尖孢鐮孢PSP抗體Anti-CD82 Antibody(PB0118)17皮質類固(17-KS)

: GIMSCAU1.080資源名稱: 陰溝腸桿菌 質量規(guī)格：>98%

棗瘋病植原體Candidatus Phytoplasma│ziziphi 質量規(guī)格：0.98

畢赤酵母Pichia│sp. 質量規(guī)格：>98%,BR
SDS-PAGE濃縮膠緩沖液ADRB1/FITC  熒光su標記腎上腺su能受體β1IgG規(guī)格： 0.2ml

ADRB2/FITC  熒光su標記腎上腺su能受體β2IgG規(guī)格： 0.2ml

ADRB2(phospho Ser346)/FITC  熒光su標記磷suan化腎上腺su能受體β2IgG規(guī)格： 0.2ml

ADRB2/RBITC  羅丹明標記腎上腺su能受體β2IgG規(guī)格： 0.2ml

ADRB3/ Beta3-AR /RBITC  羅丹明標記腎上腺su能受體β3IgG規(guī)格： 0.2ml