ATP結(jié)合蛋白家族7抗體

抗體制備過程：
1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實(shí)驗(yàn)動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實(shí)驗(yàn)活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體，抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品，產(chǎn)品品質(zhì)，價(jià)格實(shí)惠，多種規(guī)格供應(yīng)，售后完善。

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程：
1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù)：
（一）原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
（二）準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；
2.儀器
凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。
（三）操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
8異前列腺素8-iso-PG英文名稱：Mouse 8-iso prostaglandin, 8-iso-PG

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子VEGF英文名稱：Mouse Vascular Endothelial cell Growth Factor, VEGF  

血漿α顆粒膜蛋白GMP-140英文名稱：Mouse alpha-granular membrane protein, GMP-140

髓過氧化物酶MPO英文名稱：Mouse myeloperoxidase, MPO

顆粒酶BGzms-B英文名稱：Mouse granzymes B, Gzms-B

顆粒酶AGzms-A英文名稱：Mouse granzymes A, Gzms-A

補(bǔ)體蛋白4C4英文名稱：Mouse Complement 4, C4

腎素Renin英文名稱：Mouse Renin

α2抗纖溶酶α2-AP英文名稱：Mouse α2-Antiplasmin, α2-AP  

α2纖溶酶抑制物α2-PI英文名稱：Mouse α2-plasmin inhititor, α2-PI  

泛素蛋白Ub英文名稱：Mouse Ubiquitin, Ub  

αL艾杜糖苷酸酶IDUA英文名稱：Mouse α-L-iduronidase, IDUA  

αN已酰氨基葡糖苷酶αNAG英文名稱：Mouse αN-acetylglucosaminidase, αNAG  

α甘露糖苷酶α Manase英文名稱：Mouse α mannosidase, α Manase  

膜聯(lián)蛋白ⅤANX-Ⅴ英文名稱：Mouse annexin Ⅴ, ANX-Ⅴ
ATP結(jié)合蛋白家族7抗體Aspergillus sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗癌活性培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥

Peurotus ostreatus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用菌培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法

Pseudonocardia sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長條件: 56℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

Saccharomyces sp.分離基物: 土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 436生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他

Micromonospora sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 活性物質(zhì)；抗銅綠假單孢菌培養(yǎng)基: CM0038生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)

Pichia sp.分離基物: 小黃赤蜻體內(nèi)提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: YM 培養(yǎng)基：酵母提取物，3.0 g 麥芽提取物，3.0 g 葡萄糖，10.0 g 蛋白棟，5.0 g 瓊脂，20.0 g 蒸餾水1000 ml ，pH 6.2 +/- 0.2生長條件: 25℃，好氧存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Eurotium amsodami提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Vibrio parahaemolyticus提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0130生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

明亮發(fā)光桿菌種屬: Photobacterium phosphoreum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0268生長條件: 20-25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法