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土壤羥胺還原酶(HR)測試盒50管/24樣

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更新時間:2022-06-20 10:56:36瀏覽次數(shù):192

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/24樣
貨號 AS6321309 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 檢測方法 可見分光光度法
土壤羥胺還原酶(HR)測試盒50管/24樣公司正在出售的產(chǎn)品:高分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原)Anti-GADD45GIP1 Antibody豚鼠熱休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)elisa定量檢測試劑盒
鈉轉(zhuǎn)運體蛋白(多肽抗原)Anti-GALK1 Antibody豚鼠磷脂C(PLC)elisa定量檢測試劑盒
核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)Anti-GANAB Antibody大鼠轉(zhuǎn)化

詳細介紹

商品介紹:

測定意義

土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨,土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體,其強弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失,間接影響氮肥的利用效率。

測定原理

硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮氣,自身被還原為Fe2+,F(xiàn)e2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在510nm處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、震蕩儀、氮吹儀。

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

土壤羥胺還原酶(HR)測試盒50管/24樣

檢測方法

可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格

50管/24樣

產(chǎn)品貨號

AS6321309

試劑的組成和配制:

酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。

自備儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

NAD+和NADH的提取:

1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取

NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。

NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span>

NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。

NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,

混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span>

NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性

提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。

NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿

性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。

ADH測定操作:

1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。

3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。

4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。

注意:空白管只需測定一次。

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枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BS白介37試劑盒新對葉百部堿

: ATCC12291資源名稱: 假腸膜明串珠菌 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR白介35試劑盒小蕓木

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白介33試劑盒薟精
土壤羥胺還原酶(HR)測試盒50管/24樣豌豆根瘤 苯氧基乙酰谷草轉(zhuǎn)氨;天門冬氨基轉(zhuǎn)移1Elisa

褐黃木耳(琥珀木耳) 丁二酸與4-羥基-2,2,6,6-四甲基-1-的聚合物谷草轉(zhuǎn)氨;天門冬氨基轉(zhuǎn)移2Elisa

芥黃蜜環(huán) 5-溴-2-甲氧基血小板內(nèi)皮粘附分子1Elisa

BL21(DE3)star Boc-D-脯酰腫瘤壞死因子受體超家族成員4Elisa

滑假絲酵母 3-氟苯磺酰腺核苷酸Elisa

中慢生華癸根瘤 2,7-二芴逆轉(zhuǎn)錄病Elisa

釀酒酵母 1-溴-2-異氧基苯烏頭酸2Elisa

鼠李糖乳桿 西咪替丁鹽酸鹽I型膠原羥基端肽β降解產(chǎn)物Elisa

枯草芽胞桿 2-羥基-6-甲氧基苯甲烏頭酸1Elisa

釀酒酵母 3,4,5-三氟苯甲酮烏頭酸2Elisa

大豆根瘤 3-(2-吡咯基)酸甲酯粘蛋白4Elisa

草莖點霉 N-甲基-N-(4-)粘蛋白;粘液5BElisa

球孢白僵 3-溴-2-甲基三氟甲苯c-fosElisa

土壤玫瑰單胞 N-環(huán)己基脲糖皮質(zhì)受體βElisa

玉米大斑凸臍蠕孢 3,4-二氟芐核轉(zhuǎn)錄因子p50Elisa
注意事項:

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。

 


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