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詳細介紹
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹：
測定意義： 丙酮酸通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝，起著重要的樞紐作用。 測定原理： 丙酮酸與2,4-二硝ji苯肼作用，生成丙酮酸-2,4-二硝ji苯腙，在堿性溶液中呈顯色。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/96樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321150 |
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提?。喊凑战M織質量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
茶黃-3'-沒食子酯英文名： Potassium pyrophosphate, tetrabasic叉頭蛋白G1抗體包裝250mg
茶黃-3-沒食子酯英文名： Potassium tungstate, dehydrate腫瘤/抗原112抗體包裝100ml
(標準品)英文名： Quinine hemisulfate salt hydrate微管動力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體包裝25ml
柴胡（北柴胡）（標準品）英文名： Sodium phosphate, dibasic, dodecahydrateFAM50B蛋白抗體包裝500ml
柴胡皂苷A(標準品)英文名： Sodium phosphotungstate, hydrate形成2抗體（成蛋白）包裝100g
柴胡皂苷B1（標準品）英文名： Sodium stearate脂閥結構蛋白1抗體包裝25g
柴胡皂苷B2（標準品）英文名： Sodium thiosulfate anhydrous成纖維生長因子17抗體包裝1g
柴胡皂苷B3(標準品)英文名： Sulfo NHS LC Biotin成纖維生長因子23抗體包裝5g
柴胡皂苷B4英文名： Sulfo NHS SS Biotin成纖維生長因子20抗體包裝1g
柴胡皂苷C（標準品）英文名： Tetraacetylribose成纖維生長因子19抗體包裝5g
柴胡皂苷D(標準品)英文名： Tyrosine decarboxylase成纖維生長因子22抗體包裝25g
柴胡皂苷F(標準品)英文名： Victoria blue R胎球蛋白A包裝5g
柴胡皂苷G(標準品)英文名： α-Ketoglutaric acid potassium salt叉頭蛋白L2抗體包裝25g
柴胡皂苷H(標準品)英文名： 1,1-Cyclohexanediacetic acid monoamide叉頭相關轉錄因子3抗體包裝5g
柴胡皂苷I英文名： 1,2-Ethanedithiol鐵蛋白抗體包裝1g
深黃被孢霉Mortierella│isabellina 質量規(guī)格：≥60U/mg,USP,BR，可用于培養(yǎng)生長激釋放多肽試劑盒7-羥基千金子二萜;7β-Hydrox
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis Berliner 質量規(guī)格：>98%,BR生長激結合蛋白試劑盒芹糖異甘草苷;Isoliquiritin
華癸中間根瘤菌Mesorhizobium│huakuii 質量規(guī)格：含量測定生長激試劑盒5-羥色;Serotonin hydr
丙酮酸（PA)含量測試盒100管/96樣木樨草青霉 2-溴-3-氟-4-胰島樣生長因子結合蛋白5Elisa
果生鏈核盤 乙縮乙二Elisa
蟲花棒束孢 2-乙基-3-甲氧基吡CD39分子Elisa
大豆慢生根瘤 2-萘酸頻哪酯聚(ADP核糖)聚合1Elisa
白色念珠-質控 6-硝基喹喔啉-2-酮S100-β蛋白Elisa
羅氏鏈霉 丁基萘磺酸鈉磷酸化TAR DNA結合蛋白43Elisa
Bacillus anthracis 六溴環(huán)十二烷多配體蛋白聚糖1Elisa
枯草芽孢桿 4,4,4-三氟巴豆酸乙酯酪激1Elisa
短桿屬 甲基六氫苯酐Toll樣受體5Elisa
球孢白僵 L-天冬酰叔丁酯鞭毛蛋白Elisa
淡天藍鏈霉 1-Boc-3-氮雜環(huán)丁烷酮酸激Elisa
異常畢赤酵母 2--3-溴-5-氟吡啶CD247分子Elisa
大豆慢生根瘤 N-甲基正戊血小板P2Y12受體Elisa
溶桿 2,4-二甲基-5-基-1H-吡咯-3-羧酸b型鏈球抗m蛋白抗體Elisa
龜裂鏈霉 2-己基癸酸糖原合成激3Elisa
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