商品介紹:
測(cè)定意義 漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。 測(cè)定原理 漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測(cè)定ABTS自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、震蕩儀。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 土壤漆酶測(cè)試盒50管/24樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號(hào) | AS6321311 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
Methylobacterium神經(jīng)分化相關(guān)蛋白AHNAK抗體Human KCNE4 ELISA Kit小鼠Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒
嘴突凸臍蠕孢粘合連接相關(guān)蛋白1抗體Human KCNE1 ELISA Kit小鼠Ⅵ(FⅥ)免疫試劑盒
球毛殼去整合樣金屬蛋白13抗體Human KCNF1 ELISA Kit小鼠Ⅴ(FⅤ)免疫試劑盒
Marisediminicola聚集蛋白抗體Human KCNG4 ELISA Kit小鼠Ⅳ(FⅣ)免疫試劑盒
新月彎孢轉(zhuǎn)錄因子AP2α+β抗體Human KARS ELISA Kit小鼠Ⅲ(FⅢ)免疫試劑盒
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum磷化腺瘤樣息肉抗體Human ITPKC ELISA Kit小鼠Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒
香菇磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體Human JAML ELISA Kit小鼠Ⅰ(FⅠ)免疫試劑盒
耐輻射奇球菌突變株周期后期促進(jìn)蛋白亞基10抗體Human JIP1 ELISA Kit小鼠凝血原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒
柱狀環(huán)傘菌(柳菇、茶新菇)周期后期促進(jìn)蛋白亞基11抗體Human IVD(Isovaleryl-CoA dehydrogenase) ELISA Kit小鼠凝血受體(TR)免疫試劑盒
高大毛殼腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白2抗體Human ITPR1 ELISA Kit小鼠凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒
Achromobacter denitrificans磷化分裂周期蛋白16抗體Human ISG20 ELISA Kit小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)免疫試劑盒
米根霉DNA修復(fù)相互作用蛋白抗體Human IVNS1ABP ELISA Kit小鼠尿微量白蛋白(ALB)免疫試劑盒
嗜果刀孢脂肪膜相關(guān)蛋白抗體Human ISM2 ELISA Kit小鼠核苷磷化1(UPP1)免疫試劑盒
暗產(chǎn)色鏈霉菌載脂蛋白A1結(jié)合蛋白抗體抗體Human IWS1 ELISA Kit小鼠尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)免疫試劑盒
鏈霉菌載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物1抗體Human ISYNA1 ELISA Kit小鼠尿激型纖溶原激活物(uPA)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物2抗體Human ISG20L2 ELISA Kit小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)免疫試劑盒
粉褶側(cè)耳Pleurotus│rhodophyllus 質(zhì)量規(guī)格:>98%白介24試劑盒
: Fb17資源名稱: 變色多孔菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC白介23受體試劑盒烏司
Chlamydomyces palmarumChlamydomyces│palmarum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 白介23A試劑盒吳茱萸新堿
土壤漆酶測(cè)試盒50管/24樣黑木耳 正丁酯骨涎蛋白Elisa
松口蘑 2-氨基異甲酯受磷蛋白Elisa
Corynebacterium urealyticum 硫代二酸雙十八酯HAX-1蛋白Elisa
中慢生華癸根瘤 4-氨基-2-甲酸甲酯肌質(zhì)網(wǎng)鈣泵2α亞型Elisa
殺鮭氣單胞 4-溴-3-多巴受體D3Elisa
糙孢籃狀 L-異亮叔丁酯鹽酸鹽可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9Elisa
彎孢 3-甲氧基喹啉組織蛋白LElisa
谷棒桿 1-氨基-4-甲基哌核因子κB受體活化因子Elisa
佛羅里達(dá)側(cè)耳 3,6-二溴-1,2-苯二傷寒沙門氏抗體Elisa
葡萄座腔 α-環(huán)乙酮抗肌聯(lián)蛋白抗體Elisa
假單胞 6-喹喔啉羧酸肌聯(lián)蛋白Elisa
黑曲霉 2-溴-3-甲苯纖溶Elisa
波蘭青霉 環(huán)己六和精Elisa
猴頭 3-氨基己內(nèi)狂犬病特異性IgA抗體Elisa
蘇云金芽胞桿 1,1-環(huán)烷二甲酸二甲酯肝鈉Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。