霍氏液

霍氏液公司正在銷售的產(chǎn)品：犬腦鈉素(BNP)試劑盒 Anti-JMJD5 Antibody 生物素化人IgG
犬肌酸激酶同工酶MB(CKMB)試劑盒Anti-JDP2 Antibody熒光素Cy3標(biāo)記豬胰島素蛋白
犬α1酸性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒Anti-JTB Antibody(親和純化) 小鼠IgG
犬骨成型蛋白4 (BMP-4)試劑盒 Anti-JUNB Antibody小鼠IgM (

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：染色其他

儲(chǔ)存條件：4℃,避光,6個(gè)月

用途：用于玻片標(biāo)本的封固

注意事項(xiàng)：含有水合氯醛、樹膠、甘油，有一定的腐蝕性，注意操作。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

戴爾根霉抗志賀大腸桿菌O139抗體（仔豬水腫病志賀大腸桿菌O139）Human ENDOU (Poly(U)-specific endoribonuclease) ELISA KIT牛腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

泰國放線短鏈孢菌表皮生長(zhǎng)因子抗體Human EMCN (Endomucin) ELISA KIT牛脂酰脫氫免疫試劑盒

根瘤菌表皮生長(zhǎng)因子抗體Human MAT2A(S-adenosylmethionine synthase isoform type-2) ELISA Kit牛脂酰合成免疫試劑盒

弗蘭克氏菌磷化真核翻譯延長(zhǎng)因子2抗體Human DUPD1 (Dual specificity phosphatase DUPD1) ELISA KIT牛脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種真核延伸因子激2抗體Human ENDOD1 (Endonuclease domain-containing 1 protein) ELISA KIT牛脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)免疫試劑盒

賴芽胞桿菌屬磷化真核延伸因子激2抗體Human DNM1L (Dynamin-1-like protein) ELISA KIT牛脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒

中華靈芝（紫芝）真核啟動(dòng)因子2α抗體(eIFα2)Human DNAAF1 (Dynein assembly factor 1, axonemal) ELISA KIT牛載脂蛋白B100(Apo-B100)免疫試劑盒

瓶形毛殼磷化一氧化氮合成3（內(nèi)皮型）抗體Human ERAP1(Endoplasmic reticulum aminopeptidase 1) ELISA Kit牛孕激/孕(PROG)免疫試劑盒

海洋桿菌真核翻譯延長(zhǎng)因子2抗體Human EBP (3-beta-hydroxysteroid-Delta(8),Delta(7)-isomerase) ELISA KIT牛誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒

短小芽孢桿菌癌基因ERG3抗體Human DUOX1(Dual oxidase 1) ELISA Kit牛游離纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒

特里弗諾氏菌豬源產(chǎn)腸性大腸桿菌K88-K99抗體Human ENAM (Enamelin) ELISA KIT牛印度猬因子(IHH)免疫試劑盒

太平洋白單胞菌FAS凋亡抑制分子3抗體Human DSTYK (Dual serine/threonine and tyrosine protein kinase) ELISA KIT牛乙酰羧化合成(ACC)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌纖維束1抗體Human DUSP3 (Dual specificity protein phosphatase 3)ELISA KIT牛乙酰(acetyl-CoA)免疫試劑盒

交鏈孢屬叉頭蛋白P3抗體Human EMCN (Endomucin) ELISA KIT牛胰高血糖樣肽1(GLP-1)免疫試劑盒

瓦克青霉免疫球蛋白G Fc段受體IHuman MAT2A(S-adenosylmethionine synthase isoform type-2) ELISA Kit牛胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7(IGFBP-7)免疫試劑盒

釀酒酵母叉頭蛋白M1抗體Human ENDOU (Poly(U)-specific endoribonuclease) ELISA KIT牛胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)羊藿

溫哥華假單胞菌Pseudomonas│vancouverensis 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)異戊二烯

土曲霉Aspergillus│terreus Thom 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)異皮啶
霍氏液human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit  人高靈敏度促jia狀腺激su規(guī)格： 48T

human dopamine,DA ELISA KIT  人多巴an規(guī)格： 48T

human Azidothymidine,AZT ELISA Kit  人疊氮胸規(guī)格： 48T

human adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit  人促腎上腺皮質(zhì)激su規(guī)格： 48T

human corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit  人促腎上皮質(zhì)激su釋放激su規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。