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Weil髓鞘染色液

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更新時(shí)間:2022-07-25 15:38:28瀏覽次數(shù):284

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 4×50ml
貨號 FS-R6993 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6993
Weil髓鞘染色液公司正在銷售的產(chǎn)品:雞相關(guān)血漿蛋白2(PAPPA2)試劑盒Anti-CACTIN Antibody早老素蛋白-1(抗原)
雞叉頭框蛋白C1(FOXC1)試劑盒Anti-CADM2 Antibody早老素蛋白-1(S182)
雞熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒 Anti-CALB2 Antibody癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠)
雞Pirin蛋白(PIR)試劑盒Anti-CAD

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

Weil髓鞘染色液

4×50ml

FS-R6993

產(chǎn)品分類:神經(jīng)染色

儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月

用途:髓鞘染色,石蠟切片

注意事項(xiàng):主要由weil蘇木素染液、鐵明礬分化液、Weigert分化液等組成。染色結(jié)果為:髓鞘呈黑色,背景呈無色。染色時(shí)間較短。

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

蘋果雙殼菌腫瘤新因子1抗體Human FAM57B ELISA Kit兔子熱休克蛋白27(HSPB1/HSP27)免疫試劑盒

亮白曲霉膽固25α7羥化抗體Human FAM65B ELISA Kit兔子缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒

雷夫松氏菌角蛋白3+12抗體Human FAM175A ELISA Kit兔子橋粒糖蛋白2(DSC2)免疫試劑盒

白酒  酒精度接頭蛋白CrkL抗體Human FAM71F2 ELISA Kit兔子前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒

桔綠木霉色P450 24A1抗體Human FAM71E2 ELISA Kit兔子前列腺E1(PGE1)免疫試劑盒

線蟲被毛孢色P450 2R1抗體Human FAM185A ELISA Kit兔子前列腺A2 免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體Human FAM175A ELISA Kit兔子前列腺A1 免疫試劑盒

紫紅曲霉鈣周期結(jié)合蛋白抗體Human FAM71E2 ELISA Kit兔子前白蛋白(PA)免疫試劑盒

釀酒酵母7號染色體開放閱讀框69抗體Human FAM72A ELISA Kit兔子葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)免疫試劑盒

塔賓曲霉銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human FAM185A ELISA Kit兔子皮質(zhì)(CORT)免疫試劑盒

釀酒酵母19號染色體開放閱讀框71抗體Human FAM186B ELISA Kit兔子皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒

pAAV-RC2異染色體同源蛋白1抗體Human FAM71F2 ELISA Kit兔子Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒

蕈狀芽孢桿菌銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human FAM124B ELISA Kit兔子黏多糖/糖聚糖免疫試劑盒

光黑腹菌霉抗體Human FAM127A ELISA Kit兔子腦鈉(BNP)免疫試劑盒

蜂房哈夫菌4號染色體開放閱讀款Human FAM127B ELISA Kit兔子內(nèi)皮抑(ES)免疫試劑盒

草木樨中華根瘤菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體Human FAM129A ELISA Kit兔子內(nèi)皮1(ET-1)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTU3A蛋白試劑盒牛膝甾

哈茨木霉Trichoderma│harzianum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTrem樣轉(zhuǎn)錄因子1試劑盒尿苷

核盤菌Sclerotinia│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTraf2結(jié)合蛋白試劑盒
Weil髓鞘染色液LP Ab-IgM (Human Legionella antibody IgM) ELISA Kit  人軍團(tuán)junIgM規(guī)格: 48T

LP Ab-IgG(Human Legionella antibody IgG) ELISA Kit  人軍團(tuán)junIgG規(guī)格: 48T

Human paramyxovirus parotitis IgM ELISA Kit  人腮腺炎病毒IgM規(guī)格: 48T

Human paramyxovirus parotitis IgG ELISA Kit  人腮腺炎病毒IgG規(guī)格: 48T

EBv IgM(Human epstein-barr virus IgM) ELISA Kit  人EB病毒IgM規(guī)格: 48T

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 


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