詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產品名稱 | 間隙連接蛋白43抗體 |
英文名稱 | Connexin 43 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
小鼠白介素3(IL-3)薄層菌屬拉丁屬名: Hymenobacter metalli
小鼠白介素4(IL-4)白僵菌用途: 害蟲生物防治
小鼠白介素-5(IL-5)旋絲毛殼拉丁屬名: Chaetomium bostrychodes
小鼠層連蛋白/板層素(LN)黃白生叢赤殼注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)蘇云金芽孢桿菌用途: 害蟲生物防治
小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)尼泊爾正青霉拉丁屬名: Penicillium nepalense
小鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5) 嘴突凸臍蠕孢用途: 研究
小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
小鼠催產素(OT) 塔賓曲霉拉丁屬名: Aspergillus tubingensis
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX) 天格爾黃桿菌拉丁屬名: Flavobacterium tiangeerense
小鼠5核苷酸酶(5-NT)大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
小鼠神經生長因子(NGF)向煙氏鹽微菌拉丁屬名: Halomicrobium mukohataei
小鼠神經營養(yǎng)因子3(NT-3)磚紅鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces lateritius
小鼠神經營養(yǎng)因子4(NT-4)纖維素鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces cellulosae
小鼠骨保護素(OPG)太平洋萊茵海默氏菌拉丁屬名: Rheinheimera pacifica
小鼠B因子(BF)貝葉多孔菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
間隙連接蛋白43抗體游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒英文名稱:Human Free Prostate Specific Antigen,fPSA ELISA Kit*
游離*狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒英文名稱:Human Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit進口/原裝
游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒 英文名稱:Human free haemoglobin,f-Hb ELISA Kit進口/分裝
游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Free erythrocyte proloporphyrin,FEP ELISA Kit*
游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒英文名稱:Human free fatty acids,FFA ELISA Kit 進口/分裝
誘導型一氧化氮合成酶(iS)ELISA試劑盒英文名稱:Human inducible nitric oxide synthase,iS ELISA Kit *小鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠腦脊髓炎病毒(TMEV)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒 96T 試劑盒 組裝/原裝