內(nèi)源性生物素封閉液

內(nèi)源性生物素封閉液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：人乳酸脫氫酶B(LDHB)試劑盒 Anti-MBD3 Antibody腺病 IgM Ⅲ型(間接法二步法)
人乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒 Anti-MBL2 Antibody腺病 IgG Ⅶ型(間接法二步法)
人乳酸脫氫酶C(LDHC)試劑盒 Anti-MBTPS2 Antibody腺病 IgM Ⅶ型(間接法二步法)
人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)試劑盒

產(chǎn)品分類(lèi)：免疫組化

儲(chǔ)存條件：4℃,6個(gè)月

用途：免疫組化封閉液

注意事項(xiàng)：主要由蛋清和疊氮鈉組成,以此替代生物素。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

葡枝根霉銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體Human WDR92 ELISA Kit雞H5型病(H5N1)抗體(IgG)免疫試劑盒

迪吉氏黃桿菌半乳糖瓦爾登轉(zhuǎn)化抗體Human WIT1 ELISA Kit雞G0/G1期開(kāi)關(guān)基因(G0S2)免疫試劑盒

斜臥青霉半乳糖凝集10抗體Human WNK4 ELISA Kit雞FAM172A蛋白(FAM172A)免疫試劑盒

大腸桿菌半乳糖激2抗體Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit雞C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒

紅色紅曲半乳糖脫氫抗體Human WRAP53 ELISA Kit雞CD8分子(CD8)免疫試劑盒

Erwinia aphidicola 硫軟骨裂解抗體Human WRN ELISA Kit雞CD4分子(CD4)免疫試劑盒

燕麥狀曲霉多肽N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移10抗體Human WDR81 ELISA Kit雞CD3分子(CD3)免疫試劑盒

間胞囊菌多肽N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移11抗體Human WSB1 ELISA Kit雞B因子(BF)免疫試劑盒

白蘑菇多肽N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移12抗體Human WDR92 ELISA Kit雞5羥色/血清/血清(5HT/ST)免疫試劑盒

白地霉多肽N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移1抗體Human WRNIP1 ELISA Kit雞5核苷(5-NT)免疫試劑盒

冬菇晶狀體球蛋白γ3/γC-crystallin/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體Human WDR46 ELISA Kit雞Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)免疫試劑盒

白色鹽多孢菌γ-微管蛋白復(fù)合物GCP3抗體Human WEE2 ELISA Kit雞Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)免疫試劑盒

紫色團(tuán)胞鏈霉菌胍基乙N甲基轉(zhuǎn)移抗體Human WDR5 ELISA Kit雞17-類(lèi)固(17-KS)免疫試劑盒

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌α-葡萄糖苷C抗體Human WDR55 ELISA Kit雞17羥皮質(zhì)類(lèi)固(17-OHCS)免疫試劑盒

粘孢白僵菌生長(zhǎng)激釋放因子受體抗體Human WDR6 ELISA Kit雞13,14二氫15-前列腺F2α(PGFM)免疫試劑盒

釀酒酵母3-磷甘油脫氫抗體Human WDR18 ELISA Kit雞1,4,5-三磷肌(IP3)免疫試劑盒

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥98.0%(GC)四氫小檗堿

新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)棉

彩色豆馬勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%(GC)鞣花
內(nèi)源性生物素封閉液ACE I ELISA Kit  大鼠血管緊張suⅠ轉(zhuǎn)化mei規(guī)格： 48T

GnRHR ELISA Kit  大鼠促性腺激su釋放激su受體規(guī)格： 48T

AMPK ELISA Kit  大鼠磷suan化腺suan活化蛋白激mei規(guī)格： 48T

HSP47 ELISA Kit  大鼠熱休克蛋白47規(guī)格： 48T

GC ELISA Kit  大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激su規(guī)格： 48T