產(chǎn)品分類(lèi):植物染色
儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月
用途:用于植物標(biāo)本的保色。
注意事項(xiàng):有硫酸銅、乙醇等組成。如出現(xiàn)沉淀,可過(guò)濾后再使用。在制作保色浸制標(biāo)本后,瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴(yán)實(shí),并避免陽(yáng)光直射。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
紫色標(biāo)本保色液 | 2×250ml | FS-R7124 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
雙胞雙鐮孢磷化分裂周期蛋白25C抗體Human MCFD2(Multiple coagulation factor deficiency protein 2) ELISA Kit人端粒(TE)免疫試劑盒
桃色枝頂孢磷化周期依賴(lài)性激2抗體Human VIPR1(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 1) ELISA Kit人端粒保護(hù)蛋白1(POT1)免疫試劑盒
松針散斑殼質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體Human WTAP(Pre-mRNA-splicing regulator WTAP) ELISA Kit人蕈堿型乙酰受體M2(mAChRM2)自身抗體免疫試劑盒
同絲毛殼3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體Human LGALS3BP(Galectin-3-binding protein) ELISA Kit人動(dòng)力蛋白輕鏈1,質(zhì)(DYNLL1/DLC1/DNCL1/DNCLC1/HDLC1)免疫試劑盒
釀酒酵母CD134抗體Human SNX1(Sorting nexin-1) ELISA Kit人丁型肝炎病抗體(HDV antibody)免疫試劑盒
貴州青霉單核趨化蛋白5抗體Human CFLAR(CASP8 and FADD-like apoptosis regulator) ELISA Kit人丁型肝炎病(HDV)抗原免疫試劑盒
考克氏菌屬髓鞘相關(guān)糖蛋白CD57抗體Human ADCYAP1R1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide type I receptor) ELISA Kit人丁型肝炎IgM(HDV IgM)免疫試劑盒
酒色青霉角蛋白13抗體Human VIPR1(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 1) ELISA Kit人丁型肝炎IgG(HDV IgG)免疫試劑盒
加納鏈霉菌白免疫球蛋白樣受體-B抗體Human RET(Proto-oncogene tyrosine-protein kinase receptor Ret) ELISA Kit人丁酰酯(BCHE)免疫試劑盒
蠟樣芽孢桿菌CD33L抗體Human CES2(Cocaine esterase) ELISA Kit人(AZT)免疫試劑盒
球毛殼角蛋白10抗體Human CASR(Extracellular calcium-sensing receptor) ELISA Kit人調(diào)寧蛋白-1(CNN1)免疫試劑盒
印度芽孢桿菌軸突生長(zhǎng)因子CD108抗體Human VIPR2(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 2) ELISA Kit人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)免疫試劑盒
泛菌屬唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集5抗體Human PPA1(Inorganic pyrophosphatase) ELISA Kit人凋亡相關(guān)蛋白激(DAPK)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌CD329抗體Human CHAD(Chondroadherin) ELISA Kit人凋亡相關(guān)半胱肽4(Casp4)免疫試劑盒
嗜鹽梗孢酵母嗜粒趨化蛋白14抗體Human PTGES(Prostaglandin E synthase) ELISA Kit人凋亡蛋白激活因子1(APAF1)免疫試劑盒
枝孢屬1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體Human WTAP(Pre-mRNA-splicing regulator WTAP) ELISA Kit人淀粉狀蛋白β(A4)前體蛋白結(jié)合家族B成員1(FE65)免疫試劑盒
漢遜德巴酵母Debaryomyces│hansenii 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3喬松
致病性大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:100µg/mL,基體:5%HCl石吊蘭
粘性紅圓酵母Rhodotorula│mucilaginosa 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品決明子
紫色標(biāo)本保色液ST2(Human Stromelysin-2) ELISA Kit 人基質(zhì)裂解su規(guī)格: 48T
ST3(Human Stromelysin-3) ELISA Kit 人基質(zhì)裂解su規(guī)格: 48T
LXA4(Human Lipoxin A4) ELISA Kit 人脂氧suA4規(guī)格: 48T
PR3-ANCA(Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人蛋白mei3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)規(guī)格: 48T
Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit 人β-促脂su規(guī)格: 48T