草酸銨結(jié)晶紫染色液

草酸銨結(jié)晶紫染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：綿羊β2糖蛋白(β2-GP)試劑盒 Anti-CYSLTR2 Antibody胃動(dòng)素多肽
綿羊G補(bǔ)綴FHA域血管生成因子1(AGGF1)試劑盒Anti-CYSLTR1 Antibody雷帕霉素靶蛋白
綿羊膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)試劑盒 Anti-CYTIP Antibody粘蛋白-1/上皮膜
綿羊纖維蛋白原γ(FGγ)試劑盒Anti-DAAM1 Anti

產(chǎn)品分類：微生物染色

儲(chǔ)存條件：室溫,24個(gè)月

用途：改良的細(xì)菌革L(fēng)AN染色

注意事項(xiàng)：conn改良Weigert革L(fēng)AN染色液的一種

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

平菇胰輔脂抗體Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit人羥甲基戊二單酰還原(HMG-CoAR)免疫試劑盒

螺卷毛殼19號(hào)染色體開放閱讀框45抗體Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit人羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)免疫試劑盒

鮮綠青霉過氧化氫誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit人羥基賴正己(HLNL)免疫試劑盒

釀酒酵母核因子NFκB激活蛋白1抗體Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit人羥脯(Hyp)免疫試劑盒

米曲霉第12號(hào)染色體開放閱讀框23抗體Human GSK3α(Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) ELISA Kit人強(qiáng)啡肽(Dyn)免疫試劑盒

釀酒酵母γ-連環(huán)/連接蛋白γ抗體Human GSP(Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit人潛伏轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2(LTBP2)免疫試劑盒

日勾維腸桿菌10號(hào)染色體開放閱讀框4抗體Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit人潛伏膜蛋白1(LMP-1)免疫試劑盒

中國克魯維酵母10號(hào)染色體開放閱讀框47抗體Human GPI(Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit人前心鈉肽(Pro-ANP)免疫試劑盒

黃色短桿菌10號(hào)染色體開放閱讀框81抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前纖維蛋白1抗體免疫試劑盒

猴頭菌19號(hào)染色體開放閱讀框47抗體Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit人前纖維蛋白1免疫試劑盒

金黃殼囊孢19號(hào)染色體開放閱讀框54抗體Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit人前鐵調(diào)(Pro-Hepc)免疫試劑盒

貝雷絲孢酵母N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit人前列腺性磷(PAP)免疫試劑盒

球孢白僵菌19號(hào)染色體開放閱讀框18抗體Human GIF(Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit人前列腺H2(PGH2)免疫試劑盒

總狀毛霉19號(hào)染色體開放閱讀框21抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒

沼澤紅假單胞菌19號(hào)染色體開放閱讀框24抗體Human GLDL(Glycated Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人前列腺F(PGF)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit人前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒

葡萄穗霉屬Stachybotrys│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRB連接蛋白試劑盒橙花

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRB活化因子受體試劑盒長梗秦艽

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRB活化因子試劑盒常山乙
草酸銨結(jié)晶紫染色液IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit  人白介su受體相關(guān)激mei規(guī)格： 48T

UK(Human urokinase) ELISA Kit  人尿激mei規(guī)格： 48T

PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit  人磷suan烯chun式丙tongsuan羧激mei規(guī)格： 48T

Human trypsin ELISA Kit   人胰蛋白mei規(guī)格： 48T

BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit  人β位淀粉樣前體蛋白裂解mei1規(guī)格： 48T