KM滴定液

KM滴定液公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-SOX17 Antibody小鼠穿孔素
Anti-SOX6 Antibody人磷脂酰肌抗體IgG/IgM
Anti-SP2 Antibody大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3
Anti-SPIN1 Antibody大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7
Anti-SPINK6 Antibody小鼠突觸素
Anti-SPANXC Antibody人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M
Anti-S

產(chǎn)品分類：滴定液

儲(chǔ)存條件：4℃,避光,3個(gè)月

用途：參照國(guó)家藥典滴定液部分及GB/T 601配置并做相應(yīng)的標(biāo)定處理，產(chǎn)品名稱所示濃度非準(zhǔn)確值，以實(shí)際產(chǎn)品標(biāo)簽標(biāo)示濃度為準(zhǔn)。

注意事項(xiàng)：貨期3-6天，一次性訂購(gòu)10瓶及以上將優(yōu)惠，折扣為65-90%不等。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

居泉果膠抑制蛋白18抗體Anti-ADAMTS4 Antibody蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)(PDI)

薄黑孔菌α型-過(guò)氧化活化增生受體抗體（PPAR α, PPAR-α）Anti-ADIPOQ Antibody(PB0002)蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)

釀酒酵母同源盒蛋白HOXB13抗體Anti-ADIPOR1 Antibody蛋白水解誘導(dǎo)因子/皮離蛋白(PIF/DCD)

釀酒酵母磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體Anti-ADH4 Antibody蛋白激活復(fù)合體亞基2(PSME2)

平菇磷化P63腫瘤抑制基因抗體Anti-ADIPOQ Antibody(PB0003)蛋白3特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)

繩狀青霉磷化p21激活激4抗體Anti-ADH5 Antibody蛋白3抗體(PR3Ab)

淺黃隱球酵母磷化P73腫瘤抑制基因抗體Anti-ADIPOR1 Antibody蛋白3(PR3)

居真菌細(xì)菌磷化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體Anti-ADM(Adrenomedullin) Antibody蛋白磷1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)

燼灰產(chǎn)色鏈霉菌p53正向凋亡調(diào)控因子抗體Anti-ADK Antibody(PB1087)蛋白磷(PP)

叢毛單胞菌磷脂C1樣蛋白抗體Anti-ADO Antibody蛋白酪磷1B(PTP1B)

中國(guó)臺(tái)灣根霉前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白Anti-ADMR(GPR182) Antibody蛋白酪磷(PTP/PTPase/CD148)

密歇根棍狀桿菌標(biāo)記亞種重組蛋白G抗體Anti-ADO Antibody蛋白酪激(PTK/CD115)

大腸埃希菌磷脂酰肌激催化亞單位A抗體Anti-ADRA1A Antibody蛋白酪激(PTK)

板栗蛇孢日規(guī)殼蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體Anti-ADO Antibody(PB1088)蛋白聚糖4(PRG4)

間型假絲酵母足特異蛋白抗體Anti-ADORA2A Antibody蛋白聚糖(PG)

擴(kuò)展青霉改名婁地青霉腫瘤抑制基因抗體（野生型P53）Anti-ADRA1A Antibody蛋白精脫亞4(PADI4)

金龜子綠僵菌Metarhizium│anisopliae (Metschn.) Sorokīn 質(zhì)量規(guī)格：>90%,

施氏假單胞菌Pseudomonas│stutzeri 質(zhì)量規(guī)格：>95%,

紅細(xì)菌Rhodobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95%,
KM滴定液BMPs (Rabbit bone morphogenetic proteins) ELISA Kit  兔骨形成蛋白規(guī)格： 96T

OPG (Rabbit Osteoprotegerin) ELISA Kit  兔骨保護(hù)su規(guī)格： 96T

Amylin (Rabbit Amylin ) ELISA Kit  兔胰淀su規(guī)格： 96T

cTn- I (Rabbit cardiac troponin I ) ELISA Kit  兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格： 96T

RANKL (Rabbit receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit  兔核因子κB受體活化因子配基規(guī)格： 96T

重鉻酸鉀滴定液