甲基藍(lán)水溶液

甲基藍(lán)水溶液公司正在銷售的產(chǎn)品：綿羊熱休克蛋白60(HSP-60/HSPD1)試劑盒 Anti-GPRASP1 Antibody糖原合酶激酶-3β（多肽）
綿羊肝配蛋白A4 (EFNA4)試劑盒Anti-GPRC5B Antibody核突觸蛋白-γ抗原
綿羊核因子κB抑制蛋白β(IκBβ)試劑盒Anti-GPRC5D Antibody胰高血糖素樣肽-1受體多肽
綿羊肌腱蛋白X(TNX)試劑盒Ant

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產(chǎn)品分類：染色其他

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：原生動(dòng)物、細(xì)菌、神經(jīng)細(xì)胞染色,偶爾作為抑菌劑。

注意事項(xiàng)：去離子水配制

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

硫磺菌雙特異性蛋白磷10抗體Human STARD13 (StAR-related lipid transfer protein 13) ELISA KIT人白介8(IL-8/CXCL8)自身抗體免疫試劑盒

根瘤菌雙特異性蛋白磷5抗體Human STATH (Statherin) ELISA KIT人白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒

Leminorella richardii磷化動(dòng)力蛋白1抗體Human CERK(Ceramide kinase) ELISA Kit人白介7(IL-7)免疫試劑盒

硝孢鏈霉菌動(dòng)力蛋白1抗體Human SYNRG (Synergin gamma) ELISA KIT人白介6受體(IL-6R)免疫試劑盒

色串孢屬磷化動(dòng)力蛋白1抗體Human SRD5A2 (3-oxo-5-alpha-steroid 4-dehydrogenase 2) ELISA KIT人白介6(IL-6)免疫試劑盒

噬古丁節(jié)桿菌腦啡肽A抗體Human SLBP (Histone RNA hairpin-binding protein) ELISA KIT人白介5受體alpha(IL5RA)免疫試劑盒

直立枝孢強(qiáng)直性肌營(yíng)養(yǎng)不良相關(guān)蛋白9抗體Human SGPP2 (Sphingosine-1-phosphate phosphatase 2) ELISA KIT人白介5(IL-5)免疫試劑盒

釀酒酵母DYX1C1蛋白抗體Human SUCNR1 (Succinate receptor 1) ELISA KIT人白介4受體(IL4R/CD124)免疫試劑盒

柴油食烷菌E3泛蛋白連接dzip3抗體Human SRSF7 (Serine/arginine-rich splicing factor 7) ELISA KIT人白介4(IL-4)免疫試劑盒

蕈狀芽孢桿菌三磷腺苷依賴解旋DDX23抗體Human FCGRT(IgG receptor FcRn large subunit p51) ELISA Kit人白介37(IL-37)免疫試劑盒

茫崖諾氏菌多能發(fā)育相關(guān)基因5抗體Human SI (Sucrase-isomaltase, intestinal) ELISA KIT人白介35(IL-35)免疫試劑盒

泡盛曲霉三磷腺苷依賴解旋DDX3抗體Human SREK1 (Splicing regulatory glutamine/lysine-rich protein 1) ELISA KIT人白介33(IL-33)免疫試劑盒

假芽胞桿菌屬磷化三磷腺苷依賴解旋DDX3抗體Human GGT1(Gamma-glutamyltranspeptidase 1) ELISA Kit人白介32(IL-32)免疫試劑盒

廣島鏈霉菌迪格弗-梅爾基爾-克勞森綜合征相關(guān)蛋白抗體Human SULF1(Extracellular sulfatase Sulf-1) ELISA Kit人白介31(IL-31)免疫試劑盒

天目山類芽孢桿菌雙氧化激活因子2抗體Human SHFM1 (26S proteasome complex subunit DSS1) ELISA KIT人白介3(IL-3)免疫試劑盒

邊緣假單胞菌RNA結(jié)合泛連接DZIP3抗體Human SVIL (Supervillin) ELISA KIT人白介2誘導(dǎo)的T激(ITK)免疫試劑盒

鐮孢屬Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：1%鹽山楂

蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格：100(20℃)µg/mL,基體: 1%HNO3棕矢車菊

球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml異芒果苷
甲基藍(lán)水溶液SE(Human staphylococcus aureus enterotoxins) ELISA Kit  人金葡jun腸毒su規(guī)格： 48T

CNX(Human calnexin) ELISA Kit  人鈣聯(lián)蛋白規(guī)格： 48T

MIS/AMH(Human Mullerian Inhibiting Substance/Mullerian hormone) ELISA Kit  人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激su規(guī)格： 48T

BTC(Human beta cellulin) ELISA Kit  人β細(xì)胞su規(guī)格： 48T

FETU-A(Human Fetuin A) ELISA Kit  人胎球蛋白A規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。