線粒體染色液

線粒體染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：綿羊F-框蛋白2(FBXO2)試劑盒 Anti-GPR50 Antibody牛纖維蛋白原
綿羊核RNA輸出因子1(NXF1)試劑盒Anti-GPR63 Antibody凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原
綿羊非神經(jīng)元性烯化酶(NNE)試劑盒 Anti-GPR62 Antibody脂肪酸合成酶
綿羊球蛋白G3(IgG3)試劑盒Anti-GPR52 Antib

產(chǎn)品分類：染色其他

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：線粒體染色

注意事項(xiàng)：線粒體呈紅色

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

燦爛類芽孢桿菌磷化DNA甲基轉(zhuǎn)移1抗體Human SUPT5H (Transcription elongation factor SPT5) ELISA KIT人臂板蛋白3F(S3F)免疫試劑盒

紡錘形賴芽孢桿菌磷化DNA甲基轉(zhuǎn)移1抗體Human TPRA1 (Transmembrane protein adipocyte-associated 1 homolog) ELISA KIT人臂板蛋白3A(Sema 3A)免疫試劑盒

變異鏈霉菌磷化DNA甲基轉(zhuǎn)移1抗體Human IGFLR1 (IGF-like family receptor 1) ELISA KIT人吡哆/吡哆維生B6磷(PDXP)免疫試劑盒

腸沙門氏菌腸亞種7脫氫膽固還原抗體Human TCHHL1 (Trichohyalin-like protein 1) ELISA KIT人吡哆/吡哆維生B6激(PDXK)免疫試劑盒

大腸埃希氏桿菌大腦發(fā)育同源蛋白2抗體Human TAP2 (Antigen peptide transporter 2) ELISA KIT人鼻病(RV)抗體(IgA)免疫試劑盒

醬油曲霉退行性精母同源物1抗體Human TMPPE (Transmembrane protein with metallophosphoesterase domain) ELISA KIT人諾龍/去甲睪(NP)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌DSCC1蛋白抗體Human HADHB (Trifunctional enzyme subunit beta, mitochondrial) ELISA KIT人本周蛋白(BJP)免疫試劑盒

玉蜀黍赤霉誘捕受體2抗體Human TRMU (Mitochondrial tRNA-specific 2-thiouridylase 1) ELISA KIT人胞質(zhì)動(dòng)力蛋白(CD)免疫試劑盒

毛柄金錢菌(金針菇)DNA甲基轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體Human TRIO (Triple functional domain protein) ELISA KIT人胞外超氧化物歧化(SOD3)免疫試劑盒

錐形赤褶菇2-3減數(shù)分裂同源蛋白DMC1抗體Human SUPT5H (Transcription elongation factor SPT5) ELISA KIT人胞漿型磷脂A2-α(cPLA2-α)免疫試劑盒

威氏芽孢桿菌DNA連接3抗體Human DAO(D-amino-acid oxidase) ELISA Kit人包蟲抗體IgG 免疫試劑盒

豬丹絲菌磷化DNA依賴性蛋白激抗體Human TPRA1 (Transmembrane protein adipocyte-associated 1 homolog) ELISA KIT人膀胱腫瘤抗原(BTA)免疫試劑盒

枯草芽胞桿菌磷化DNA依賴性蛋白激抗體Human TMPPE (Transmembrane protein with metallophosphoesterase domain) ELISA KIT人膀胱癌抗原(UBC)免疫試劑盒

希爾青霉DNA聚合δ2/DNA pol δ 2抗體Human IGFLR1 (IGF-like family receptor 1) ELISA KIT人伴侶蛋白10(CPN10)免疫試劑盒

畢赤酵母DNA聚合δ催化亞單位/DNA pol δ cat抗體Human TRAF3IP3 (TRAF3-interacting JNK-activating modulator) ELISA KIT人半乳糖凝集-7(Gal-7)免疫試劑盒

蠟狀芽孢桿菌DNA聚合η抗體Human TBKBP1 (TANK-binding kinase 1-binding protein 1) ELISA KIT人半乳糖(Galactose)免疫試劑盒

地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,溶劑:1.5 mol/L HNO3土荊皮

芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：1000mg/l,溶劑：1%硫原花青B1

鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：500mg/l,溶劑:1%硫里林
線粒體染色液VD(Human Vitamin D) ELISA Kit  人維生suD規(guī)格： 48T

VK1(Human Vitamin K1) ELISA Kit  人維生suK1規(guī)格： 48T

VB12(Human Vitamin B12) ELISA Kit  人維生suB12規(guī)格： 48T

VD3(Human Vitamin D3) ELISA kit  人維生suD3規(guī)格： 48T

VD2(Human Vitamin D2) ELISA Kit  人維生suD2規(guī)格： 48T