莢膜染色液

莢膜染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：雞胱抑素C(Cys-C)試劑盒Anti-CLCF1 Antibody腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原
雞核孔蛋白98kda(NUP98)試劑盒Anti-CLCN4 AntibodyFas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗原
雞接觸蛋白相關(guān)蛋白樣蛋白2(CNTNAP2)試劑盒Anti-CLCN6 Antibody粘著斑激酶抗原
雞酸性磷酸酶1(ACP1)試劑盒 Anti-CLCN7 Antib

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：微生物染色

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：觀察細(xì)菌莢膜

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

球孢白僵菌腫瘤/抗原2抗體Human Cavin 1(Polymerase I and transcript release factor) ELISA Kit人牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)免疫試劑盒

灰銹赤鏈霉菌腫瘤/抗原1BHuman INT6(IntegRator complex subunit 6) ELISA Kit人牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌皮膚T淋巴瘤相關(guān)抗原5抗體（腦膜瘤表達(dá)抗原6）Human INT8(IntegRator complex subunit 8) ELISA Kit人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)免疫試劑盒

海膽橙色小單孢菌腫瘤/抗原3抗體Human D2HGDH(D2-HydroxyglutaRate Dehydrogenase) ELISA Kit人血影蛋白(spectrin)免疫試劑盒

平菇腦多巴神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體Human Total ER(Estrogen Receptor) ELISA Kit人血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)免疫試劑盒

糞生糞殼菌鈣依賴分泌激活蛋白2/自閉癥的相關(guān)蛋白抗體Human SAKL(Soluble alpha-Klotho) ELISA Kit人血血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒

蠟狀芽孢桿菌膽囊收縮A受體抗體Human HIF3A(Hypoxia-inducible factor 3-alpha) ELISA Kit人血小板因子3(PF-3)免疫試劑盒

Pseudomonas小腦肽3抗體Human Total HSP-90(Heat Shock Protein 90 total) ELISA Kit人血小板衍生生長(zhǎng)因子CC(PDGF-CC)免疫試劑盒

同合小克銀漢霉周期依賴性激樣5抗體Human CASP5(Caspase-5) ELISA Kit人血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌α1-chimaerin蛋白抗體Human Glicentin(Glicentin) ELISA Kit人血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒

釀酒酵母信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白9復(fù)合體7b抗體Human RF-IgG(Rheumatoid Factor IgG) ELISA Kit人血小板型磷果糖激(PFKP)免疫試劑盒

大腸埃希菌鈣調(diào)神經(jīng)磷調(diào)節(jié)蛋白1抗體（唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1）Human RF-IgA(Rheumatoid Factor IgA) ELISA Kit人血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)免疫試劑盒

黑腐皮殼菌鈣調(diào)神經(jīng)磷調(diào)節(jié)蛋白3抗體（唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白3）Human RF-IgM(Rheumatoid Factor IgM) ELISA Kit人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)免疫試劑盒

短密籃狀菌Centaurin α1抗體Human PAX-8(Paired box protein pax-8) ELISA Kit人血小板生成自身抗體(IgG)免疫試劑盒

假單胞菌屬B淋巴白血病/淋巴瘤11/鋅指蛋白856抗體Human CAMP(Cathelicidin Antimicrobial Peptide) ELISA Kit人血小板生成受體(C-MPL)自身抗體IgG 免疫試劑盒

沙地海源菌B淋巴白血病/淋巴瘤11B抗體Human pro-BDNF(pro Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit人血小板生成(TPO)免疫試劑盒

果生假絲酵母Candida│carpophila 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRGAD/IA2自身抗體灰氈毛忍冬皂苷

戊糖乳桿菌Lactobacillus│pentosus 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRG1/S特異性周期蛋白E1試劑盒海藻糖

黃色赤桿菌Erythrobacter│flavus 質(zhì)量規(guī)格：>70%,BSF-肌動(dòng)蛋白試劑盒紅鏈霉-龍膽二糖苷
莢膜染色液DPD(Human Deoxypyridinoline crosslinks) ELISA Kit  人脫氧膠原吡啶交聯(lián)規(guī)格： 48T

PYD(Human Pyridinoline crosslinks) ELISA Kit  人膠原吡啶交聯(lián)規(guī)格： 48T

SPA(Human Staphylococal protein A) ELISA Kit  人葡萄球jun蛋白A規(guī)格： 48T

ConA(Human concanavalin A) ELISA Kit  人刀豆suA規(guī)格： 48T

FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin) ELISA Kit  人游離原卟啉規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。