產(chǎn)品分類(lèi):微生物染色
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:也稱(chēng)作吉曼尼茲染色液,立克次體、埃立克體、沃爾巴克體、病毒包涵體等染色,菌體呈紅色/鮮紅色、深藍(lán)色等,背景呈綠色或青綠色
注意事項(xiàng):由堿性品紅、孔雀石綠等組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢(xún)并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Gimenez染色液 | 2×50ml | FS-R7072 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn),搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn),來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應(yīng)曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白125抗體Human DPYD(Dihydropyrimidine Dehydrogenase) ELISA Kit人免疫抑制性糖蛋白免疫試劑盒
貝爾氏菌屬卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體Human DSE(Dermatan Sulfate Epimerase) ELISA Kit重鏈可變區(qū)(IgHV)免疫試劑盒
類(lèi)黃假單胞菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90A抗體Human DPT(Dermatopontin) ELISA Kit重鏈(IgH)免疫試劑盒
葡萄座腔菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白71抗體Human DPP6(Dipeptidyl Peptidase VI) ELISA Kit輕鏈lambda(λ-IgLC)免疫試劑盒
粗糙脈孢菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體Human DPYD(Dihydropyrimidine Dehydrogenase) ELISA Kit輕鏈kappa(κ-IgLC)免疫試劑盒
喜堿運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體Human DSE(Dermatan Sulfate Epimerase) ELISA Kit結(jié)合蛋白(BIP)免疫試劑盒
蠟樣狀芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體Human DSP(Desmoplakin) ELISA Kitγ-1 鏈C 區(qū)(IGHGI)免疫試劑盒
豬放線(xiàn)桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白58抗體Human DR-70TM(Tumor Marker DR-70 For Lung Cancer) ELISA KitM(IgM)免疫試劑盒
膜醭畢赤酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白94抗體Human CX43(Connexin 43) ELISA Kitj鏈(Ig-j)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白82抗體Human DBP/DNA Binding Protein(DNA Binding Protein) ELISA KitG4(IgG4)免疫試劑盒
羊肚伴生菌CDK5激活結(jié)合蛋白2抗體Human EAR2(Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 2) ELISA KitG(IgG)免疫試劑盒
黃棕色鏈霉菌CDK2相互作用蛋白抗體Human Dyn(Big Dynorphin) ELISA KitG Fc片段(Fcγ)免疫試劑盒
德?tīng)柌加墟呓湍钢芷诘鞍滓蕾?lài)性激14抗體Human CYSLTR2(Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA KitG Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)免疫試劑盒
乳桿菌癌胚抗原相關(guān)粘附分子19抗體Human CSF2Rβ(Colony Stimulating Factor 2 Receptor Beta) ELISA KitG Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)免疫試劑盒
扭曲毛殼先天性紅生成異常性貧血蛋白1抗體Human DGAT1(Diacylglycerol O-acyltransferase 1) ELISA KitG Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)免疫試劑盒
*蛹蟲(chóng)草癌胚抗原相關(guān)粘附分子16抗體Human CSNK2A2(Casein Kinase 2, alpha 2 Polypeptide) ELISA KitE(IgE)免疫試劑盒
鼠傷菌Salmonella│typhimurium 質(zhì)量規(guī)格:D,99.9%Adropin試劑盒
磚紅色微桿菌Microbacterium│testaceum 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%, acidity 90% IN D2O ADP-核糖基化因子5試劑盒白果雙黃
阿爾及亞擬盤(pán)多毛孢Pestalotiopsis│algeriensis 質(zhì)量規(guī)格:D, 99%, acidity 96-98% IN D2O ADP-核糖基化因子4試劑盒3-表熊果
Gimenez染色液LAP(Human Leucine aminopepridase) ELISA Kit 人亮氨酰氨基肽mei規(guī)格: 48T
SK(Human Streptokinase) ELISA Kit 人鏈激mei規(guī)格: 48T
RNASE(Human Ribonuclease) ELISA Kit 人核糖核suanmei規(guī)格: 48T
LPO(Human lipid peroxlde) ELISA Kit 人過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物mei規(guī)格: 48T
PON(Human paraoxonase) ELISA Kit 人對(duì)氧磷mei規(guī)格: 48T