溴百里酚藍(lán)-酚紅指示劑

溴百里酚藍(lán)-酚紅指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒Anti-ADGRG1 Antibody牛血清白蛋白（標(biāo)準(zhǔn)）
雞腫瘤標(biāo)志物CA724(CA724)試劑盒 Anti-ADGRG5 Antibody髓鞘堿性蛋白(多肽）大鼠
雞肌紅蛋白(MYO)試劑盒Anti-ADGRG6 Antibody血管活性腸肽
雞血小板因子3(PF3)試劑盒Anti-ADGRL2 Antibod

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：指示劑

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：混合酸堿指示劑,變色點(diǎn)pH7.5

注意事項(xiàng)：酸色：黃色,堿色：紫色。終點(diǎn)附近指示劑顏色變化的參考顏色：pH7.2暗綠色,pH7.4淡綠色,放置后顏色會逐漸退去。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

黑色淺灰鏈霉菌血管生成樣蛋白4抗體Human KCNIP1 ELISA Kit小鼠葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒

弗吉亞鏈霉菌整合樣金屬蛋白與凝血10型抗體Human KCTD14 ELISA Kit小鼠破傷風(fēng)(Tetanus)抗體免疫試劑盒

鐮刀菌嘧啶核內(nèi)切2抗體Human KCNIP3 ELISA Kit小鼠破骨分化因子(ODF)免疫試劑盒

根瘤菌神經(jīng)絲蛋白抗體Human KCNJ5 ELISA Kit小鼠蘋果脫氫(MDH)免疫試劑盒

污黑腐皮殼β淀粉樣肽（1-28）抗體Human KCNAB1 ELISA Kit小鼠核苷磷化(PNP)免疫試劑盒

銹色桿孢囊菌有絲分裂激B抗體Human KCNAB2 ELISA Kit小鼠皮質(zhì)/腎上腺(CORT)免疫試劑盒

灰葡萄孢（灰霉病菌）軟骨蛋白聚糖抗體Human KCNC4 ELISA Kit小鼠皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒

毛榛畢赤酵母去整合樣金屬蛋白10抗體Human KCNB1 ELISA Kit小鼠牛小腸堿性磷(CIAP)免疫試劑盒

釀酒酵母含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族9抗體Human KCNE1 ELISA Kit小鼠XIII B(F13B)免疫試劑盒

蠟?zāi)俸^蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族8抗體Human KCNE4 ELISA Kit小鼠XIII A1(F13A1)免疫試劑盒

釀酒酵母植物生長激ABP1抗體Human KARS ELISA Kit小鼠VIIIa輕鏈(F8aLC)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌肌動蛋白相關(guān)蛋白1抗體Human KCNF1 ELISA Kit小鼠Ⅻ(FⅫ)免疫試劑盒

金針菇（毛柄金錢菌、冬菇）α紅分化相關(guān)因子抗體Human KCNB1 ELISA Kit小鼠Ⅺ(FⅪ)免疫試劑盒

葡萄鏈格孢*血管緊張激活蛋白1抗體Human KCNG4 ELISA Kit小鼠Ⅹ(FⅩ)免疫試劑盒

焦曲霉Alpha清蛋白抗體Human KCNAB2 ELISA Kit小鼠Ⅸ(FⅨ)免疫試劑盒

粘質(zhì)AFAP1L2抗體Human KCNC4 ELISA Kit小鼠Ⅷ(FⅧ)免疫試劑盒

黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級白介28A試劑盒環(huán)戊烯二

球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格：>99%，分子生物學(xué)級白介26試劑盒環(huán)戊烯二

馬杜放線菌Actinomadura│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%，分子生物學(xué)級白介25試劑盒無梗五加苷B
溴百里酚藍(lán)-酚紅指示劑GM(Human Gastric Mucin) ELISA Kit  人胃粘液su規(guī)格： 48T

HABP(Human Hya]uronate binding protein) ELISA Kit  人透明質(zhì)suan結(jié)合蛋白規(guī)格： 48T

X(Human cross linked N-telopeptide of type I collagen) ELISA Kit  人Ⅰ型膠原N末端肽規(guī)格： 48T

Hp-IgM(Human Helicobacter pylori IgM) ELISA Kit  人幽門螺旋桿junIgM規(guī)格： 48T

CagA(Human Cytotoxin-associated protein) ELISA Kit  人細(xì)胞毒su相關(guān)蛋白A規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。