產(chǎn)品分類(lèi):培養(yǎng)基
儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月
用途:生長(zhǎng)素,主要用于配制MS培養(yǎng)基,植物組織培養(yǎng)
注意事項(xiàng):無(wú)菌溶液。NAA(α-萘乙酸)、弱堿組成,不含乙醇,屬于激素類(lèi)物質(zhì)。該試劑經(jīng)過(guò)濾除菌處理,稀釋至1×使用。每1ml溶液可制備1000ml培養(yǎng)基,配制好的1×工作液其N(xiāo)AA濃度為0.2mg/L
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢(xún)并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
NAA母液 | 10ml | FS-R6483 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
AV-951 Adenosine磷化鈣調(diào)磷B亞基B1抗體包裝5g
BGJ398(NVP-BGJ398) Adiphenine HCl羊毛甾14α-去基化蛋白抗體包裝5g
Carmustine(進(jìn)分) Adiphenine HCl補(bǔ)體C5抗體包裝1g
CEP-18770 Alarelin Acetate5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體包裝250mg
HSP990 Alendronate Sodium5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體包裝250mg
MK4827 (Niraparib) Alendronate Sodium5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框49抗體包裝250mg
O-6-芐基鳥(niǎo) Allopurinol5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框35抗體包裝1g
Ruxolitinib(INCB018424) pho... Allopurinol中心體蛋白192抗體包裝25g
SB431542,SB-431542 Allylestrenol中心體蛋白27抗體包裝5g
TAE684 Allylestrenol中心體蛋白290抗體包裝100g
Tamoxifen Citrate Alprostadil,PGE1,中心體蛋白63抗體包裝25g
Tariquidar,XR-9576 Altrenogest中心體蛋白70/p10結(jié)合蛋白抗體包裝5g
阿法替 Altrenogest中心體蛋白72抗體包裝1ml
阿法替雙馬來(lái)鹽 Amantadine HCl中心體蛋白95抗體包裝25g
阿西替 Amantadine HCl中心體蛋白89抗體包裝1g
: AS2.606資源名稱(chēng): 橢圓釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,三合物胰高血糖樣肽1試劑盒異綠原C;Isochlorogenic
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,三合物胰高血糖試劑盒異綠原B;Isochlorogenic
曼小毛霉原變種Micromucor│ramarnianus 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)≥750IU/MG,BP,BR胰多肽試劑盒異綠原A;Isochlorogenic
NAA母液Langerin/CD207/FITC 熒光標(biāo)記白分化抗原CD207IgG3-羥-1,2,3-苯并三-4(3H)-酮 98%
LAMA3/Laminin 5 alpha 3/FITC 熒光標(biāo)記層粘蛋白α3IgG2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟酯 99%
LAP18/stathmin/FITC 熒光標(biāo)記白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18IgG1-羥-7-偶氮苯并三氮唑 99%
Phospho-Stathmin (Ser16) /FITC 熒光標(biāo)記化原癌因蛋白18IgGN-羥-5-降稀-2,3-二酰亞 99%
Phospho-Stathmin (Ser38)/FITC 熒光標(biāo)記化原癌因蛋白18IgG1,2-二氫-2-異丁氧喹啉-1-異丁酯 98%
LAT/FITC 熒光標(biāo)記T活化連接蛋白IgG對(duì)苯二單酯 97%
Phospho-LAT (Tyr171) /FITC 熒光標(biāo)記化T活化連接蛋白IgGS--L-半胱氨亞砜 99%
Phospho-LAT (Tyr191) /FITC 熒光標(biāo)記化T活化連接蛋白IgG1-(均苯-2-砜)-3-硝-1,2,4-三唑 99%