詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | 補體C1QL4鏈多肽抗體 |
英文名稱 | C1QL4 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA) 葉點霉屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
抗脂酰絲氨酸抗體(APSA) 鹽古桿菌拉丁屬名: Natrinema sp.
抗壁酸抗體(TA) 流產布魯氏菌 生物Ⅱ型拉丁屬名: abortus BiovarⅡ
抗淋巴細胞毒抗體(ALA/LCA) 中性彎曲嗜酸菌拉丁屬名: Streptacidiphilus neutrinimicus
抗巨噬細胞抗體(anti-macrophage Ab) 產朊假絲酵母拉丁屬名: Candida utilis
抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab) 黑木耳注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
抗紅細胞抗體(RBC) 中慢生華癸根瘤菌用途: 與紫云英共生結瘤固氮
28S抗核糖體抗體(28S rRNP) 殺鮭氣單胞菌拉丁屬名: Aeromonas salmonicida
抗核仁抗體(ANA) 黃色短桿菌拉丁屬名: Brevibacterium flavum
抗核膜糖蛋白210抗體(gp210) 大腸埃希氏菌用途: 益生菌
抗肝細胞胞質1型抗體(LC1) 蘑菇輪枝孢拉丁屬名: Lecanicillium psalliotae
抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab) *勝利油田熱微球菌拉丁屬名: Methermicoccus shengliensis
抗胸腺細胞球蛋白(ATG) 黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
抗表皮細胞基底膜抗體(EBMZ) 異配囊接霉拉丁屬名: Mucor heterogamus
抗浦肯野細胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo) 熱帶鹽水孢菌拉丁屬名: Salinispora tropica
抗Sa抗體(anti-Sa-Ab) 大腸桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
補體C1QL4鏈多肽抗體乙酰輔酶A結合蛋白抗體Cannabisin F中文名:別名:分子式:C36H36N2O8
脂肪醛脫氫酶抗體Grossamide中文名:別名:分子式:C36H36N2O8
腺相關病毒5 VP1抗體Raucaffricine中文名:別名:分子式:C27H32N2O8
抗利尿激素1A抗體N-Feruloyloctopamine中文名:別名:分子式:C18H195
抗利尿激素受體1B抗體3-Hydroxysarpagine中文名:別名:分子式:C19H22N2O3