公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: 土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內(nèi)活性微生物量以及其對(duì)有機(jī)物的降解活性,可以作為土壤微生物的降解性能指標(biāo)。 測(cè)定原理: 氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在細(xì)胞呼吸過(guò)程中接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈現(xiàn)紅色,在波長(zhǎng)485nm處有最大吸收峰,采用分光光度法于485nm測(cè)定其吸光值,即得土壤脫氫酶活性。 自備實(shí)驗(yàn)儀器及用品: 篩子、天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機(jī)、漏斗,濾紙、可見(jiàn)分光光度計(jì)、玻璃比色可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、冰、蒸餾水、丙酮(不允許快遞,請(qǐng)用戶自備)。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
2,2'-聯(lián)四唑-1,1'-二基(洛沙坦雜質(zhì))英文名: 1-BromopyreneT淋巴凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體包裝500g
2,2-二基-4-異基-1,3-并二茂英文名: 4-Bromopyrene蛋白調(diào)解因子9抗體包裝25g
2,3,4-三-O-酰-泊-β-D-葡萄糖苷...英文名: 1,6-Diaminopyrene胰腺激抗體包裝5g
2,3-去亞異基酯英文名: 1,3-Diaminopyrene纖溶相關(guān)蛋白B2抗體包裝1g
2,3-脫氫鈉鹽英文名: 2,7-Di-tert-butylpyrene多聚合α/β/γ抗體包裝5g
2,4-二(三基硅烷基)-5-英文名: 1-Nitropyrene含脯突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體包裝1g
2,4-二基-6-基-7-蝶啶英文名: 4-Nitropyrene外周蛋白2抗體包裝5g
2-(R)-[1-(R)-(3,5-二(三基)基...英文名: 2-Aminofluorene區(qū)帶蛋白PZP抗體包裝100mg
2-[(2,6-二)基]英文名: 2-Amino-9-fluorenone蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1β(FTβ)抗體包裝1g
2-(巰基)腺苷 5'-三磷四鈉鹽合物英文名: 2-Amino-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白15抗體包裝250mg
2-基-5,6-二-3(4H)-喹唑啉醋(阿那格...英文名: 9-Bromofluorene原鈣粘蛋白β2抗體包裝1g
2-基-6,8-二羥基鹽鹽英文名: 2-Bromofluorene原鈣粘蛋白β4抗體包裝25g
2-基-6-羥基-8-巰基英文名: 2-Bromo-9-fluorenone原鈣粘蛋白γ10抗體包裝5g
2-基-6-巰基-9-D-核苷合物英文名: 2-Bromo-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白γA4抗體包裝1g
2-基腺苷英文名: 2,7-Diaminofluorene原鈣粘蛋白γA2抗體包裝25g
乳酪棒桿菌Corynebacterium│casei 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品谷脫羧65試劑盒木糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū)
總狀毛霉Mucor│racemosus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品谷脫羧試劑盒果糖成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品谷受體試劑盒糖精鈉;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū)
土壤脫氫酶(SDHA)測(cè)試盒100管/96樣短桿狀馬賽 1,3,5-三(4-溴苯基)苯膜結(jié)合型前列腺E合成1Elisa
西奈青霉 4-(三氟甲基)環(huán)己酮磷酸化P38蛋白Elisa
抗輻射鏈霉 順式環(huán)己-1,2-二甲酰亞磷酸化c-jun氨基末端蛋白激Elisa
哈茨木霉 4-羥基-2,6-二甲酸RNA聚合轉(zhuǎn)錄終止因子ⅠElisa
松鼠葡萄球松鼠亞種 2-溴肉桂酸維甲酸Elisa
紅色紅曲霉 3--2-甲酸Ca-Mg-ATPElisa
根瘤 4--2-甲酸黃體生成受體Elisa
大豆慢生根瘤 2-萘乙白介17DElisa
黑腐皮殼 L-精硝酸鹽基質(zhì)γ羧基谷蛋白Elisa
中華根瘤 6--5-氮雜Ⅰ型膠原C端肽β特殊序列Elisa
解淀粉芽孢桿解淀粉亞種 三(三氟磺酸)鋁鈣調(diào)Elisa
竹喙球 2--1,1,1-氧基乙烷α酮戊二酸Elisa
猴頭菇 8-溴甲基喹啉雌酮Elisa
鏈格孢 3-甲三鹽脫氫表雄酮硫酸酯Elisa
釀酒酵母 丁酰乳酸丁酯聚(ADP核糖)聚合1Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。