蘋果酸脫氫酶提取試劑

蘋果酸脫氫酶提取試劑公司正在銷售的產(chǎn)品：兔孕/孕酮(Pg)試劑盒Anti-GZMB Antibody腫瘤壞死因子受體超家族成員13B抗體
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兔脂肪酸去飽和酶2 (FADS2)試劑盒Anti-HAS2 Ant

產(chǎn)品分類：細胞組分分離

儲存條件：—20℃,避光,12個月

用途：主要用于裂解植物組織，提取樣品中的蘋果酸脫氫酶

注意事項：蘋果酸脫氫酶(Malate Dehydrogenase, MDH)是合成蘋果酸的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸和草酰乙酸(OAA)的相互轉(zhuǎn)化，參與眾多生理代謝途徑如TCA循環(huán)C4循環(huán)脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等，因此MDH在植物的生長發(fā)育中發(fā)揮著重要作用，廣泛存在于線粒體、細菌細胞膜上，為三羧酸循環(huán)中的一種酶，由于酶的來源不同，其某些性質(zhì)也不盡相同。MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、?耄???鉩?????蘢????娂蒼????逝

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

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泊金酯(標準品) Hypericin磷化整合β2/Integrin β2抗體包裝5g

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可占替諾（煙占替諾）標準品 Barnidipine HCl液泡蛋白分選蛋白VPS13A抗體包裝1g

羅替（標準品） Cefepime Hydrochloride鈣調(diào)磷B相關(guān)蛋白2抗體包裝1g

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莫雜質(zhì)Ⅰ/2,6-二基-4-（3-基）-... Paeonol硫軟骨2抗體包裝1g

群（標準品） Paeonol碳化合物磺基轉(zhuǎn)移10抗體包裝5g

群雜質(zhì)A（標準品） Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine碳化合物磺基轉(zhuǎn)移11抗體包裝1g

索（標準品） Liranaftate碳化合物磺基轉(zhuǎn)移12抗體包裝250g

根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品間粘附分子2試劑盒絲石竹皂苷元3-O-B-D葡萄糖酯

香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP5.0間粘附分子1試劑盒L-鼠李糖;L(+)-Rhamnose

CBS277.70=ATCC22054資源名稱: 森正青霉 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品性T淋巴相關(guān)抗原4試劑盒松香;Abietic Acid
蘋果酸脫氫酶提取試劑PERK/FITC  熒光標記蛋白激R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激IgG鈉，無水 AR,99.0%             

Phospho-PERK (Thr980)/FITC  熒光標記化蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激IgG鈉，無水 99.99% metals basis

peripherin/FITC  熒光標記外周蛋白IgG鋅，二水 AR,99.0%

HSP-27/HRP  辣根過氧化物標記熱休克蛋白27IgG鋅，二水 CP,98.0%

P-fscn1/FITC  熒光標記化纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 IgG鋅，二水 99.99% metals basis

PG-C/FITC  熒光標記胃蛋白原CIgG鋅，二水 99.995% metals basis

PGC-1 Alpha/FITC  熒光標記過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1αIgG無水醋鋅 CP,99.0-1.0%

PGE2/FITC  熒光標記前列腺E2IgG2-酰吡啶 98%