商品介紹:
商品介紹 測定意義 肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間隙腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面,可促進(jìn)脂蛋白中的膽固醇向類固醇激素轉(zhuǎn)化,血漿中的HL活性增高時,血漿中小顆??蓪?dǎo)致LDL水平升高,加速動脈粥樣硬化的發(fā)生。 測定原理 肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚,可與固藍(lán)B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
腎茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: N'-Nitro-L-arginine-methyl ester hydrochlorideG基丁受體3抗體包裝100mg
升麻(興安升麻)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl esterG基丁受體α3抗體包裝500mg
升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: AEBSF HClGEN1蛋白抗體包裝10MG
升麻-4'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名: AEBSF HCl谷酰磷核糖基焦磷?;D(zhuǎn)移包裝25g
升麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Bestatin HClα-半乳糖苷抗體包裝5g
升麻苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 1,10-Phenanthroline hydrochloride monohydrate蛋白偶聯(lián)受體55抗體包裝1g
升麻-3-O-α-L-伯糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Phosphoramidon disodium salt生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ包裝25g
生脈提取物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Decyl β-D-glucopyranoside 生長停滯特異性蛋白2家族3抗體包裝5g
勝紅薊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Dolutegravir,GSK1349572顆粒K抗體包裝1g
圣草次苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Dodecyl glucopyranoside甘油磷二酯磷結(jié)構(gòu)域5抗體包裝25g
圣草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Hydroxyethyl Celluloseγ谷酰轉(zhuǎn)移抗體包裝5g
蓍草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Hydroxyethyl CelluloseG1基丁A型受體α1抗體包裝250mg
十七碳酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Hydroxyethyl Cellulose谷脫羧-65抗體包裝100g
石菖蒲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Isopropyl β-D-thiogalactoside谷脫羧-65抗體(C端)包裝25g
石吊蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Mannose半乳糖凝集3抗體包裝5g
地下節(jié)桿菌Arthrobacter│subterraneus 質(zhì)量規(guī)格:含量測定內(nèi)皮抑試劑盒羅紅霉;Roxithromycin
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,可用于培養(yǎng)內(nèi)皮型一氧化氮合成試劑盒吉堿;Wilforgine
葡萄球菌Staphylococcus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測定內(nèi)皮特異分子-1試劑盒次堿;Wilforine
肝脂酶(HL)測試盒100管/48樣傷口埃希氏 乙酰唑轉(zhuǎn)化生長因子P1Elisa
構(gòu)巢裸胞殼 2-(trifluoromethyl)benzenecarbothioamide乙脫氫1家族成員A2Elisa
短小克銀漢霉 環(huán)酸神經(jīng)生長因子前體Elisa
嗜酸乳桿 3,5-雙(三氟甲基)苯肼乙脫氫1家族成員A2Elisa
坎氏弧 二甲基二酸抗核IgA抗體Elisa
短裙竹蓀1-4 (+)-苯并四咪唑抗核IgM抗體Elisa
戊糖乳桿 5--2-戊酮缺氧誘導(dǎo)因子1αElisa
蘇云金芽孢桿東北亞種 仲丁基酸食道癌相關(guān)基因4Elisa
卵形孢霉屬 Boc-(S)-3-甲酸溶血?;D(zhuǎn)移Elisa
皺褶假絲酵母 2-氟-4-甲氧基藍(lán)氏賈弟鞭毛蟲IGG抗體Elisa
暗黑微綠鏈霉 2-(2,4,5-Trifluorophenyl)ethanol20-a羥基孕酮Elisa
土地叢毛單胞 4-硝基-3-(三氟甲基)H5N1-IgG抗體Elisa
粉狀畢赤酵母 三氟磺酸鉍H5N1-IgM抗體Elisa
麥根腐平臍蠕孢 氨地平KH型剪接調(diào)節(jié)蛋白Elisa
解烴棒桿 5-溴-2-吡啶甲星狀病IGM抗體Elisa