商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 土壤淀粉酶測(cè)試盒50管/24樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號(hào) | AS6321298 |
商品介紹:
測(cè)定意義 淀粉酶(EC3.2.1.1)是催化淀粉水解的一類(lèi)酶的總稱(chēng)。土壤中的淀粉酶主要來(lái)自于微生物,是一種重要的酶制劑,廣泛應(yīng)用于糧食加工、食品、釀造、發(fā)酵、紡織品工業(yè)和醫(yī)藥行業(yè)。 測(cè)定原理 淀粉酶水解淀粉產(chǎn)生還原糖,可與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在508nm處有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與還原糖量成正比。 需自備的儀器和用品 天平、可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
巨大芽胞桿菌錨定蛋白G抗體Human LRRC52 ELISA Kit豬Ⅶ(FⅦ)免疫試劑盒
杰丁塞伯林德納氏酵母肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體Human LRWD1(Leucine-rich repeat and WD repeat-containing protein 1) ELISA Kit豬Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒
淡黃濕傘整合樣金屬蛋白與凝血1型抗體Human LRSAM1 ELISA Kit豬凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒
Streptomyces setonensis Shomura整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體 (N端抗體)Human LSAMP ELISA Kit豬腦鈉(BNP)免疫試劑盒
單核增生李斯特氏菌整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體Human LSG1 ELISA Kit豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT1)免疫試劑盒
黑曲霉內(nèi)收蛋白抗體Human LRRC29 ELISA Kit豬內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒
梨形卷枝霉脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體Human LSM1 ELISA Kit豬內(nèi)皮1(ET-1)免疫試劑盒
假絲酵母屬脂聯(lián)受體1抗體Human LRRC4C ELISA Kit豬末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒
鼠李糖小短桿菌腎上腺髓質(zhì)受體抗體Human LRRC18 ELISA Kit豬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(AMH)免疫試劑盒
釀酒酵母脂聯(lián)抗體Human LSG1 ELISA Kit豬免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒
分枝桿菌腎上腺髓質(zhì)抗體Human LRRC52 ELISA Kit豬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
蒙古口蘑腺苷受體A3抗體Human LRRC20 ELISA Kit豬免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型ADRA2腎上腺能受體2抗體Human LRCH3 ELISA Kit豬免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒
鏈霉菌腎上腺能受體β1抗體Human LRCH2 ELISA Kit豬糜蛋白免疫試劑盒
凍土毛霉腎上腺能受體β2/β2-AR抗體Human LRPPRC ELISA Kit豬流行性乙型腦炎抗體(IgG)免疫試劑盒
樟疫霉晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體Human LRP2BP ELISA Kit豬磷脂A2(PLA2G1B)免疫試劑盒
#金針菇Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 質(zhì)量規(guī)格:BR補(bǔ)體片斷3b試劑盒竹紅菌
費(fèi)希新薩托菌Neosartorya│fischeri 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR補(bǔ)體片斷3a試劑盒藏紅花
匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格:BR補(bǔ)體片段4d試劑盒cis-紫莖女貞苷B
土壤淀粉酶測(cè)試盒50管/24樣鐮刀屬 4--2-乙酰CoA羧化Elisa
凍土毛霉 5-乙基-2-硫脲嘧啶半乳糖凝集8Elisa
鞘氨盒 3-氟-2-羥基粘蛋白1Elisa
宛氏擬青霉 瑞波粘蛋白2Elisa
樺剝管孔 7-氟-1H-吲唑熱休克蛋白47Elisa
砂單胞 D-二對(duì)甲酰一水物(D-DTTA.H2O)ⅨElisa
耐寒短桿 4--3-羥基消退DElisa
粘紅酵母 安宮消退EElisa
紅球 1-甲基-2-氧代-1,2-二氫-吡啶-4-羧酸線(xiàn)粒體鈣離子單向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa
白色短波單胞 聚(烯·鹽酸)骨成型蛋白15Elisa
梭 1-(4-)乙主要組織相容性復(fù)合體II類(lèi)Elisa
燕麥鐮孢 3,6-二羥基萘-2,7-二磺酸二鈉雌受體αElisa
短密青霉 2,4-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)髓過(guò)氧化物Elisa
雞樅(雞) 4--2-甲氧基苯β-半乳糖腦苷脂Elisa
枯草芽孢桿 2-氨基-4,6-二-5-甲基嘧啶磷脂A2Elisa