商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 乙醇含量測(cè)試盒50管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號(hào) | AS632110 |
商品介紹:
測(cè)定意義: 酒是含酒精(乙醇)飲料的統(tǒng)稱,乙醇是酒的主要成分,是衡量酒質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。我國(guó)是早發(fā)明釀酒的國(guó)家,也是酒類消費(fèi)大國(guó),其消費(fèi)量居世界首。因此,快速、準(zhǔn)確測(cè)定酒中乙醇含量,對(duì)于確保酒的質(zhì)量和保護(hù)消費(fèi)者的健康具有重大意義。 測(cè)定原理: 乙醇在乙醇脫氫酶的催化下氧化脫氫生成乙醛,同時(shí),NAD被還原生成NADH,NADH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,通過(guò)450 nm下測(cè)定吸光值變化可測(cè)得乙醇含量。 需自備的儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
生長(zhǎng)激釋放多肽(GHRP)英文名:GHRP ELISA Kit載脂蛋白L3抗體包裝25g
生長(zhǎng)激(GH)英文名:GH ELISA Kit腫瘤/抗原81抗體包裝5g
生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)英文名:GDF15 ELISA Kit共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣2抗體包裝20MG
腎損傷分子1(Kim-1)英文名:Kim-1 ELISA Kit鹽耐藥蛋白ARS2抗體包裝1g
腎前體(renin precursor)英文名:renin precursor ELISA Kit芳香基硫酯1抗體包裝1g
腎(Renin)英文名:Renin ELISA Kit鹽轉(zhuǎn)運(yùn)三磷腺苷抗體包裝25g
腎上腺髓質(zhì)(ADM)英文名:ADM ELISA Kit精tRNA的蛋白轉(zhuǎn)移1抗體包裝5g
腎上腺能a1A受體(ADRA1A)英文名:ADRA1A ELISA Kit共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣1抗體包裝100g
腎上腺(EPI)英文名:EPI ELISA Kit孤獨(dú)癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關(guān)蛋白1)包裝25g
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)英文名:NT-4 ELISA Kit脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體包裝5g
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)英文名:NT-3 ELISA Kit芳香基硫酯H抗體包裝250mg
神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)英文名:nNOS/NOS1 ELISA Kit溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體包裝1g
神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1(NCAM1)英文名:NCAM1 ELISA Kit載脂蛋白1抗體包裝100g
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)英文名:NRG4 ELISA Kit突觸融合結(jié)合蛋白6抗體包裝25g
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(NRG3)英文名:NRG3 ELISA Kit精1抗體包裝500g
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體血小板因子4(PF4)Ciproxifan is a highly potent and selective histamin H3-receptor antagonist with
乙醇含量測(cè)試盒50管/48樣油橄欖生曲霉 2-甲氧基-5-氨基阿爾茨海默病相關(guān)神經(jīng)絲蛋白Elisa
分枝農(nóng)霉 2-四氫糠酸阿立新AElisa
楚氏喜鹽芽孢桿 3-氟-4-酸阿瓦斯丁Elisa
芽孢桿 4-氨基-3-硝基吡啶癌基因蛋白質(zhì)p190;bcr-ablElisa
山扁豆生棒孢 3-環(huán)己烯-1-甲癌胚抗原Elisa
瑞氏青霉 2-硝基-4-甲砜苯癌癥促凝Elisa
大麗花輪枝孢 L-纈芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽氨酰磷酸合成2Elisa
葡枝根霉 反-4-三氟甲基肉桂酸氨酰磷酸合成IElisa
研究團(tuán)隊(duì)節(jié)桿 5-硝基-6-甲基脲嘧啶氨基脲敏感性氧化Elisa
芽孢八疊球?qū)?/span> 1-金剛烷甲酮八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4Elisa
乳酒假絲酵母 3,5-二硝基-4-甲酸白蛋白Elisa
玫煙色棒束孢 2,4,5-三氟苯甲白介12受體β2Elisa
秀珍菇 2-甲氧基白介17受體Elisa
冷溫木克酵母 2-甲基-3-氨基-6-吡啶白介-18結(jié)合蛋白Elisa
樹(shù)脂殼 對(duì)甲酸白介18受體Elisa