詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS632110 |
商品介紹:
測定意義: 酒是含酒精(乙醇)飲料的統(tǒng)稱,乙醇是酒的主要成分,是衡量酒質量的重要指標之一。我國是早發(fā)明釀酒的國家,也是酒類消費大國,其消費量居世界首。因此,快速、準確測定酒中乙醇含量,對于確保酒的質量和保護消費者的健康具有重大意義。 測定原理: 乙醇在乙醇脫氫酶的催化下氧化脫氫生成乙醛,同時,NAD被還原生成NADH,NADH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,通過450 nm下測定吸光值變化可測得乙醇含量。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
生長激釋放多肽(GHRP)英文名:GHRP ELISA Kit載脂蛋白L3抗體包裝25g
生長激(GH)英文名:GH ELISA Kit腫瘤/抗原81抗體包裝5g
生長分化因子15(GDF15)英文名:GDF15 ELISA Kit共濟失調蛋白7樣2抗體包裝20MG
腎損傷分子1(Kim-1)英文名:Kim-1 ELISA Kit鹽耐藥蛋白ARS2抗體包裝1g
腎前體(renin precursor)英文名:renin precursor ELISA Kit芳香基硫酯1抗體包裝1g
腎(Renin)英文名:Renin ELISA Kit鹽轉運三磷腺苷抗體包裝25g
腎上腺髓質(ADM)英文名:ADM ELISA Kit精tRNA的蛋白轉移1抗體包裝5g
腎上腺能a1A受體(ADRA1A)英文名:ADRA1A ELISA Kit共濟失調蛋白7樣1抗體包裝100g
腎上腺(EPI)英文名:EPI ELISA Kit孤獨癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關蛋白1)包裝25g
神經營養(yǎng)因子4(NT-4)英文名:NT-4 ELISA Kit脊髓小腦共濟失調2型蛋白抗體包裝5g
神經營養(yǎng)因子3(NT-3)英文名:NT-3 ELISA Kit芳香基硫酯H抗體包裝250mg
神經型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)英文名:nNOS/NOS1 ELISA Kit溴區(qū)結構域相鄰鋅指蛋白1A抗體包裝1g
神經細胞粘附分子1(NCAM1)英文名:NCAM1 ELISA Kit載脂蛋白1抗體包裝100g
神經調節(jié)蛋白4(NRG4)英文名:NRG4 ELISA Kit突觸融合結合蛋白6抗體包裝25g
神經調節(jié)蛋白3(NRG3)英文名:NRG3 ELISA Kit精1抗體包裝500g
錨蛋白重復結構域蛋白13B抗體血小板因子4(PF4)Ciproxifan is a highly potent and selective histamin H3-receptor antagonist with
乙醇含量測試盒50管/48樣油橄欖生曲霉 2-甲氧基-5-氨基阿爾茨海默病相關神經絲蛋白Elisa
分枝農霉 2-四氫糠酸阿立新AElisa
楚氏喜鹽芽孢桿 3-氟-4-酸阿瓦斯丁Elisa
芽孢桿 4-氨基-3-硝基吡啶癌基因蛋白質p190;bcr-ablElisa
山扁豆生棒孢 3-環(huán)己烯-1-甲癌胚抗原Elisa
瑞氏青霉 2-硝基-4-甲砜苯癌癥促凝Elisa
大麗花輪枝孢 L-纈芐酯對甲苯磺酸鹽氨酰磷酸合成2Elisa
葡枝根霉 反-4-三氟甲基肉桂酸氨酰磷酸合成IElisa
研究團隊節(jié)桿 5-硝基-6-甲基脲嘧啶氨基脲敏感性氧化Elisa
芽孢八疊球屬 1-金剛烷甲酮八聚體結合轉錄因子4Elisa
乳酒假絲酵母 3,5-二硝基-4-甲酸白蛋白Elisa
玫煙色棒束孢 2,4,5-三氟苯甲白介12受體β2Elisa
秀珍菇 2-甲氧基白介17受體Elisa
冷溫木克酵母 2-甲基-3-氨基-6-吡啶白介-18結合蛋白Elisa
樹脂殼 對甲酸白介18受體Elisa