公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義山梨醇廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是糖運(yùn)輸形式之一,而且與生物抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān)。因此,在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測(cè)山梨醇含量變化。測(cè)定原理山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍(lán)色絡(luò)合物,在655nm波長(zhǎng)有特征吸收峰。需自備的儀器和用品可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
磺雙氫麥角堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 21-Acetoxypregnenolone相似腫瘤抑制基因HUGL抗體包裝1g
基多巴(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: phelloptorin白介1β抗體包裝25g
基黃連堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ellagic acidβ-乳球蛋白抗體包裝5g
基蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Tetrahydropalmatine脂質(zhì)磷磷相關(guān)蛋白1/可塑性相關(guān)基因3抗體包裝100g
基麥冬二氫高異黃A,基麥冬黃烷A英文名: 4-Bromobenzylamine神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體包裝25g
基麥冬黃A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ganoderenic acid B富含亮重復(fù)家庭蛋白1抗體包裝500g
基麥冬黃烷B英文名: Tetrahydropalmatine富含亮重復(fù)家庭蛋白4抗體包裝1g
溴東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tetrahydropalmatine瘦受體抗體(長(zhǎng))包裝5g
假人參皂苷RT1英文名: Pregnenolone Acetate白血病抑制因子抗體包裝1g
見(jiàn)血飛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Pregnenolone AcetateNogo受體反應(yīng)蛋白抗體包裝25g
劍麻皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Chitosan凋亡抑制蛋白抗體包裝5g
箭根薯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Chitosan層粘連蛋白抗體包裝100g
江南卷柏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: AllicinLpin1 抗體包裝25g
江藤苷英文名: α-CyperoneLpin1 抗體包裝5g
姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Cefaclor溶菌抗體包裝1g
暗棕色桿菌Phaeobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量≥99%抗軟骨抗體試劑盒肥皂草;Saponin
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%抗?fàn)盍霾?7型試劑盒法林二;Falcarindiol
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗絨毛膜促性腺激抗體試劑盒蜂斗菜內(nèi)酯A;Bakkenolide A
山梨醇含量測(cè)試盒50管/48樣黑木耳 4'-氟苯酮二乙烯原葉綠酸酯Elisa
黑曲霉 3,4-二氟油菜類(lèi)固Elisa
地下節(jié)桿 間氟木葡聚糖內(nèi)糖基轉(zhuǎn)水解Elisa
解淀粉芽孢桿 3-溴-4-三氟甲苯維生KElisa
枯草芽孢桿 1-異基咪唑Flag標(biāo)簽Elisa
3-氟-4-甲苯異分支酸合Elisa
小鏈霉 2,4-二氟甲苯異分支酸裂解Elisa
繩生毛殼 2-氟-4-甲苯葉綠降解過(guò)氧化物Elisa
釀酒酵母 2--4-氟甲苯脂肪酸分解Elisa
黑木耳(186) 4-氟-2-甲基轉(zhuǎn)移1Elisa
巨大芽孢桿 4-氟-3-磷脂酸磷酸酯Elisa
Candida 2,5-二氟甲苯羥化Elisa
變平滑假絲酵母 2-溴-5-氟甲苯異分支酸合成Elisa
柴油食烷 4-(4-甲氧基苯基)丁酸異分支酸裂解Elisa
Enterobacter cowanii Inoue et al. 2,3-二氟絲蛋白抑制劑Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。