產(chǎn)品分類:細(xì)胞組分分離
儲存條件:4℃,12個月
用途:裂解紅細(xì)胞之前,清洗紅細(xì)胞,效果較PBS好。
注意事項:無菌溶液。主要由10mM PBS、氯化鈉、氯hua鉀等組成。經(jīng)高壓滅菌處理。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
紅細(xì)胞洗滌液 | 100ml | FS-R6509 |
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
Finasteride(標(biāo)準(zhǔn)品) Torasemide豬瘟病抗體包裝1g
Fludrocortisone acetate(標(biāo)準(zhǔn)品... Travoprost嗜鉻粒蛋白C抗體包裝5g
Flumethasone(標(biāo)準(zhǔn)品) Trazodone HCl煙堿型乙酰受體α10/AChRα10抗體包裝5g
Fluocinolone Acetonide(標(biāo)準(zhǔn)品) Trazodone HCl煙堿型乙酰受體α6/AChRα6抗體包裝5MG
Fluorometholone(標(biāo)準(zhǔn)品) Trilostane煙堿型乙酰受體α9/AChRα9抗體包裝1g
Fluticasone Propionate(標(biāo)準(zhǔn)品) Trilostane煙堿型乙酰受體δ/AChRδ抗體包裝5g
Gefitinib(標(biāo)準(zhǔn)品) Triptorelin Acetate凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝1g
Gemcitabine HCl(標(biāo)準(zhǔn)品) Vancomycin HCl凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝5g
Gestodene(標(biāo)準(zhǔn)品) Vancomycin HClβ衣被蛋白抗體包裝100mg
Hexestrol(標(biāo)準(zhǔn)品) Vandetanib 半胱蛋白4/11抗體包裝1g
Hydrocortisone(標(biāo)準(zhǔn)品) Varenicline Tartrate1號染色體開放閱讀框187抗體包裝1g
Hydroxyprogesterone caproat... Varenicline Tartrate9號染色體開放閱讀框61抗體包裝5g
L-(-)-葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinorelbine TartrateC末端結(jié)合蛋白2抗體包裝25g
L-半胱(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinorelbine Tartrate21號染色體開放閱讀框13抗體包裝1g
L-茶(標(biāo)準(zhǔn)品) Voriconazole蛋白3抗體包裝250mg
藍(lán)灰干酪菌Tyomyces│caesius 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血清淀粉樣蛋白A4試劑盒小檗紅堿硫酯;
舟狀單頂孢Monacrosporium│scaphoides 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,合物血清淀粉樣蛋白A3試劑盒小檗紅堿;Berberrubine
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血清淀粉樣蛋白A試劑盒腺;Adenine
紅細(xì)胞洗滌液MYL3/Myosin light chain 3/Biotin 生物標(biāo)記 肌球蛋白輕鏈3IgG雙組份無吡啶滴定劑 2mg水/ml,測含水量較低樣品
MLH1/FITC 熒光標(biāo)記錯配修復(fù)蛋白1IgG雙組份無吡啶滴定劑 1mg水/ml,測含水量較低樣品
MMP-1/FITC 熒光標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白-1IgG雙組份無吡啶溶劑 用作反應(yīng)介質(zhì)
MMP-1/FITC 熒光標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白-1容量法雙組份含吡啶溶液A 3mg水/1mlA+B,測定常規(guī)樣品
MMP-2/FITC 熒光標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白-2IgG雙組份油類測定用溶劑 反應(yīng)介質(zhì)
MMP-3/FITC 熒光標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白-3IgG2'-氨苯酮 97%
MMP-7/PE 熒光PE標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白-7IgG2-氨-4,6-二氧嘧啶 98%
MMP-8/FITC 熒光標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白-8IgG2-氨-4,6-二嘧啶 98%