耐酸性α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基

耐酸性α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：兔胸腺肽β10(TMSβ10)試劑盒Anti-CYP27A1 Antibody抑癌基因Rbms3抗體
兔Syncollin蛋白(SYCN)試劑盒Anti-CYP2A6 Antibody抵抗素樣分子α抗體
兔抗磷脂抗體(APA)試劑盒 Anti-CYP27A1 Antibody質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體
兔絲蛋白酶12(PRSS12)試劑盒Anti-CYP

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件  4℃,6個(gè)月

用途  多用于黑曲霉培養(yǎng)進(jìn)而產(chǎn)生α-淀粉酶

注意事項(xiàng)  無菌溶液。主要由1.5%可溶性淀粉、1.5%蔗糖、0.3%磷酸二氫鈉、0.01%氯化鈣、0.01%硫酸鐵等組成，亦含有硫酸鎂、檸檬酸氫二銨等，一般pH值為5.0，經(jīng)15psi高壓滅菌20min

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

α-胞襯蛋白(SPTAN1)SPTAN1 ELISA Kit鈣連蛋白抗體包裝500g

α白蛋白(AFM)AFM ELISA Kit二氫嘧啶相關(guān)蛋白2抗體包裝50mg

α2-纖溶抑制因子(α2PI)α2PI ELISA Kit色P450ⅡE1抗體包裝1g

α2-巨球蛋白(α2M)α2M ELISA Kit趨化因子受體1抗體包裝100g

α2-HS糖蛋白(αHSG)αHSG ELISA Kit磷化原癌基因c-Raf抗體包裝25g

α1-微球蛋白(α1M)α1M ELISA Kit磷化致癌基因C-Myc抗體包裝500g

α1-性糖蛋白(α1AGP)α1AGP ELISA KitCD33抗體包裝1g

α1-抗(α1AT)α1AT ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g

Zeste同源物增強(qiáng)子1(EZH1)EZH1 ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗體包裝1g

YY肽(PYY)PYY ELISA Kit離子通道蛋白3抗體包裝25g

X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)XRCC6 ELISA Kit磷化周期E抗體包裝5g

X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白5(XRCC5)XRCC5 ELISA Kit磷化分裂周期蛋白25C抗體包裝250mg

X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)XBP1 ELISA Kit磷化周期依賴性激9抗體包裝1g

Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)WFS1 ELISA Kit磷化Connexin 43蛋白抗體包裝5g

WNT1誘導(dǎo)信號(hào)通道蛋白1(WISP1)WISP1 ELISA Kit絲切蛋白抗體包裝100g

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：純度98%以上異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G試劑盒乙酰纈草三酯;Acevaltratum

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E試劑盒乙酰哈巴苷;8-O-Acetylharp

CGMCC1.5361=JCM14000資源名稱: 黃微球菌 質(zhì)量規(guī)格：含量測定異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D試劑盒異型南五味子丁;Heterocliti
耐酸性α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基Integrin Alpha3/FITC  熒光標(biāo)記整合α3IgG硅烷 >98.0%(GC)

Integrin Alpha3 Beta1/FITC  熒光標(biāo)記整合α3β1IgG鄰 AR,98%

Integrin a7/FITC  熒光標(biāo)記整合α7IgG間 CP

Integrin AlphaE2/CD3 /FITC  熒光標(biāo)記整合αE2IgG鄰苯二 AR,99.0%

Integrin alpha E2 /FITC  熒光標(biāo)記整合alpha E2 IgG鄰苯二 CP,98.0%

Integrin AlphaM/CD11b /FITC  熒光標(biāo)記巨噬表面分子/整合-α2IgG鄰苯二 standard for GC, ≥99.5% (GC)

Integrin avb3/FITC  熒光標(biāo)記整合avb3IgG2,6-二 99%

Integrin AlphaV Beta5/FITC  熒光標(biāo)記整合αVβ5IgG2,6-二