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NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒100管/96樣

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更新時(shí)間:2022-06-14 15:28:47瀏覽次數(shù):214

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號(hào) AS632121 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 檢測(cè)方法 微量法
NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒100管/96樣公司正在出售的產(chǎn)品:半乳糖凝集相關(guān)蛋白A抗體Anti-PAX1/FITC 熒光標(biāo)記配對(duì)盒基因1抗體IgG
半乳糖凝集12抗體Anti-PAX2/FITC 熒光標(biāo)記配對(duì)盒基因2抗體IgG
γ氨基丁運(yùn)載蛋白3抗體Anti-RACK1/FITC 熒光標(biāo)記受體活蛋白C1抗體IgG
GTPIMAP家族成員1抗體Anti-PAX3/FITC 熒光標(biāo)記配

詳細(xì)介紹

試劑的組成和配制:

酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

商品介紹:

測(cè)定意義:

ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來(lái)植物ME活性測(cè)定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對(duì)底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。

測(cè)定原理:

NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測(cè)定NADH增加速率。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒100管/96樣

檢測(cè)方法

微量法

產(chǎn)品規(guī)格

100管/96樣

產(chǎn)品貨號(hào)

AS632121

NAD+和NADH的提?。?/span>

1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取

NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span>

NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,

混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span>

NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性

提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿

性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

ADH測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。

3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。

4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。

注意:空白管只需測(cè)定一次。

注意事項(xiàng):

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。

骨粘連蛋白(ON)英文名:ON ELISA Kitβ淀粉樣肽(1-28)抗體包裝5g

骨形成蛋白6(BMP-6)英文名:BMP-6 ELISA Kit有絲分裂激B抗體包裝5g

骨形成蛋白(BMPs)英文名:BMPs ELISA Kit軟骨蛋白聚糖抗體包裝25g

骨涎蛋白(BSP)英文名:BSP ELISA Kit去整合樣金屬蛋白10抗體包裝5g

骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)英文名:CTX-2 ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族9抗體包裝100mg

骨特異性堿性磷B(ALP-B)英文名:ALP-B ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族8抗體包裝1ml

骨特性堿性磷(BALP)英文名:BALP ELISA Kit植物生長(zhǎng)激ABP1抗體包裝25ml

骨橋(OPN)英文名:OPN ELISA Kit肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體包裝5ml

骨膠原交聯(lián)(Cr)英文名:Cr ELISA Kitα紅分化相關(guān)因子抗體包裝1g

骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)英文名:OT/BGP ELISA Kit血管緊張激活蛋白1抗體包裝5g

骨鈣(OT)英文名:OT ELISA KitAlpha清蛋白抗體包裝1g

骨鈣(BGP)英文名:BGP ELISA KitAFAP1L2抗體包裝1g

骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)英文名:BMPR-Ⅱ ELISA Kit神經(jīng)分化相關(guān)蛋白AHNAK抗體包裝5MG

骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)英文名:BMPR-1A ELISA Kit粘合連接相關(guān)蛋白1抗體包裝1g

骨成型蛋白9(BMP-9)英文名:BMP-9 ELISA Kit去整合樣金屬蛋白13抗體包裝5g

脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)Fluticasone Propionate is a synthetic glucocorticoid, used to treat non-allergic
NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒100管/96樣新疆溶桿 2-氨基異丁酸乙酯鹽酸鹽谷氧還蛋白1Elisa

黑木耳 2-基苯基酸1,3-酯谷氧還蛋白2Elisa

擬青霉 福沙吡坦骨保護(hù)Elisa

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 5-甲氧基-1H--3-甲酸甲酯骨成型蛋白2Elisa

皺環(huán)球蓋菇 1-N-Cbz-4-N-(Boc-氨甲基)骨成型蛋白4Elisa

米蘭鏈霉 3-氨基-2-基-6-溴吡骨成型蛋白6Elisa

規(guī)則東方喜鹽 芐基-2-乙骨成型蛋白7Elisa

枯草芽孢桿 3-溴-5-(三氟甲基)芐骨成型蛋白受體2Elisa

白酒    2-氨基-4,6-二-5-甲酰基嘧啶骨鈣Elisa

釀酒酵母 道古霉骨堿性磷酸Elisa

玫瑰淡紫鏈霉 對(duì)羥基乙酯骨堿性磷酸Elisa

黑色淺灰鏈霉 PD158780骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)Elisa

弗吉尼亞鏈霉 2,4-二甲基吡咯-3-羧酸骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)Elisa

鐮刀 4-溴-3-甲氧基甲酯骨橋Elisa

根瘤 (4-溴-2-基)甲骨特異性堿性磷酸Elisa


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