商品介紹:
測定意義 POD(EC 1.11.1.7)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。 測定原理 POD催化H2O2氧化特定底物,在470nm有特征光吸收。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
死亡關(guān)聯(lián)蛋白激3(DAPK3)英文名:DAPK3 ELISA Kit電壓依賴性鈣通道CACNA1G+CACNA1H抗體包裝5MG
死亡關(guān)聯(lián)蛋白激1(DAPK1)英文名:DAPK1 ELISA Kit鈣結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
斯鈣1(STC1)英文名:STC1 ELISA Kit神經(jīng)型一氧化氮合成結(jié)合蛋白抗體包裝25g
絲切蛋白1(CFL1)英文名:CFL1 ELISA Kit蕈堿型乙酰受體M4抗體包裝5g
絲裂原激活蛋白激激激激5(MAP4K5)英文名:MAP4K5 ELISA Kit鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體包裝25g
絲聚蛋白(FLG)英文名:FLG ELISA Kit周期蛋白結(jié)合蛋白抗體包裝5g
絲棕櫚酰轉(zhuǎn)移長鏈堿性亞基1(SPTLC1)英文名:SPTLC1 ELISA Kit分裂周期蛋白2抗體包裝10MG
絲蛋白1(PRSS1)英文名:PRSS1 ELISA Kit分裂周期調(diào)控蛋白45抗體包裝5mg
雙調(diào)蛋白(AREG)英文名:AREG ELISA Kit染色體相關(guān)蛋白H抗體包裝1g
雙特異性磷5(DUSP5)英文名:DUSP5 ELISA Kit中心體蛋白質(zhì)76抗體包裝5g
雙特異性磷1(DUSP1)英文名:DUSP1 ELISA Kit中心體蛋白152抗體包裝2g
雙特異性酪磷化調(diào)節(jié)激1A(DYRK1A)英文名:DYRK1A ELISA Kit酪蛋白激1γ2/casein kinase Iγ1抗體包裝500mg
雙糖鏈蛋白聚糖(BGN)英文名:BGN ELISA Kit唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白1抗體包裝1g
雙腎上腺皮質(zhì)激樣激1(DCLK1)英文名:DCLK1 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員8抗體包裝250mg
雙腎上腺皮質(zhì)激(DCX)英文名:DCX ELISA Kit趨化樣因子超家族成員1抗體包裝1g
耶納農(nóng)球菌Agrococcus│jenensis 質(zhì)量規(guī)格:>500U/mg,BR自然抗性相關(guān)巨噬蛋白1試劑盒竹紅菌;hypocrellin A
節(jié)桿菌Arthrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量測定轉(zhuǎn)鐵蛋白受體試劑盒紫萁;Osmundacetone
蛹蟲草Cordyceps│militaris 質(zhì)量規(guī)格:純度>99%,BR轉(zhuǎn)錄中介因子1-β試劑盒藏紅花;Potassium 7-Hyd
過氧化物酶(POD)測試盒50管/48樣副干酪乳桿 氨基磺酸鈉?;囸IElisa
Bacillus aryabhattai N-苯甲酰基-L-精線粒體呼吸鏈復(fù)合物Elisa
白鱗馬勃 4-乙基苯磺酰線粒體呼吸鏈復(fù)合物IIIElisa
抗生鏈霉 N-三苯甲基咪唑線粒體呼吸鏈復(fù)合物IVElisa
燕麥鐮孢 四氟酸硝酰陽離子線粒體融合2Elisa
木賊鐮孢 N-Cbz-4-甲酸甲酯腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G1Elisa
空氣近藤氏酵母 4-羥基-6-三氟甲基嘧啶腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2Elisa
玫瑰黃鏈霉 三化釕三水合物腺苷酸環(huán)化Elisa
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 4-溴-2-苯甲腺苷酸環(huán)化1Elisa
靈芝 N-(2-氨基乙基)-4-嗎啉甲酰草酸鹽腺苷酸環(huán)化3Elisa
厭鹽假諾氏 2,2,4,6,7-五甲基二氫苯并-5-磺酰腺苷脫氨Elisa
大腸埃希 1,2,4,5-四溴消退D1Elisa
異常畢赤酵母 2-(7-甲氧基萘-1-基)乙消退E1Elisa
蘇云金芽孢桿松球亞種 1,3二甲基戊鹽酸鹽消退E2Elisa
大腸埃希氏 1,3-苯并惡唑-6-羧酸心肌肌鈣蛋白ⅠElisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。