詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
甜菜堿溶液 | 10ml | FS-R7415 |
產(chǎn)品分類:PCR相關
儲存條件:4℃,12個月
用途:增強PCR擴增效率
注意事項:有超純進口甜菜堿及超純水配置而成。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)N-乙?;D移2抗體Human APOH(Beta-2-glycoprotein 1) ELISA Kit睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)
宇佐曲霉富含亮重復結構域蛋白2抗體Human FST(Follistatin) ELISA Kit結核菌(Tuberculin)
熱栗色鏈霉菌孤兒核受體TAK1抗體Human AKT1(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase) ELISA Kit結核菌桿抗體IgM(TB-Ab IgM)
玉米黑粉菌骨巢蛋白抗體Human COL15A1(Collagen alpha-1 XV) ELISA Kit結核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)
峨眉山鏈霉菌軸突生長誘向因子5抗體Human SERPINE1(Plasminogen activator inhibitor 1) ELISA Kit結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)
球孢白僵菌磷化p-IκB-α抗體Human PDGFC(Plaet-derived growth factor C) ELISA Kit結合珠蛋白(HPT)
枯草芽孢桿菌G21蛋白質抗體Human INHA(Inhibin alpha chain) ELISA Kit結締組織生長因子(CTGF)
暗黃紫鏈霉菌醌氧化還原抗體Human FGF2(Heparin-binding growth factor 2) ELISA Kit結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)
枯草芽孢桿菌神經(jīng)肽Y1受體抗體Human KitLG(Kit ligand) ELISA Kit結蛋白(Des)
淺紫灰鏈霉菌產(chǎn)色變種谷受體1抗體Human TIE1(Tyrosine-protein kinase receptor Tie-1) ELISA Kit結腸癌抗原(CCA)
佛羅里達側耳谷受體調節(jié)蛋白2抗體Human TNFSF10(Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit窖蛋白(Cav-1)
溶血 水解1抗體Human CGA(Chromogranin A) ELISA Kit角化生長因子(KGF)
雅致小克銀漢霉神經(jīng)生長因子誘導蛋白抗體Human FTH1(Ferritin heavy chain) ELISA Kit角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)
馬爾他布魯氏菌核孔蛋白50抗體Human FTL(Ferritin light chain) ELISA Kit膠轉蛋白(TAGLN)
鴨疫里氏桿菌軸索過度生長抑制因子-A抗體Human AMH(Muellerian-inhibiting factor) ELISA Kit膠質纖維性蛋白(GFAP)
乳糖細黃鏈霉菌一氧化氮合成-1抗體(神經(jīng)型)Human RORC(Nuclear receptor ROR-gamma) ELISA Kit膠質源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)
嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質量規(guī)格:國7-15 units/mg,來源于地衣芽孢桿菌黃楊堿
牛鏈球菌Streptococcus│bovis 質量規(guī)格:>98%,BR丁香
喜溫硫桿狀菌Acidithiobacillus│caldus 質量規(guī)格:>98%,標準品黃芪皂苷III
甜菜堿溶液ER(Mouse Estradiol receptor) ELISA Kit 小鼠雌二chun受體規(guī)格: 48T
PTHrP(Mouse Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit 小鼠jia狀旁腺激su相關蛋白規(guī)格: 48T
LPA(Mouse L-phenylalanine) ELISA Kit 小鼠ben丙氨suan規(guī)格: 48T
ACA-IgA(Mouse cardiolipin antibody IgA) ELISA Kit 小鼠抗心磷脂IgA規(guī)格: 48T
ACA-IgM(Mouse cardiolipin antibody IgM) ELISA Kit 小鼠抗心磷脂IgM規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。