TB固體培養(yǎng)基粉劑

TB固體培養(yǎng)基粉劑公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：兔滑行蛋白β(TXLNb)試劑盒Anti-CD5 Antibody磷酸化心臟磷蛋白抗體
兔神經(jīng)絲蛋白(NF)試劑盒Anti-CD59 Antibody蛋白酪酸磷酸酶樣N前體蛋白抗體
兔八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)試劑盒Anti-Cd59 Antibody26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型p55抗體
兔抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)試劑盒Anti-CD58

產(chǎn)品分類(lèi)：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件  室溫,24個(gè)月

用途  質(zhì)粒制備、蛋白質(zhì)表達(dá)

注意事項(xiàng)  主要由胰蛋白胨和酵母提取物、磷酸鹽、瓊脂組成。如要求無(wú)菌,可高壓滅菌15～20min。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢(xún)并訂購(gòu)！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn)，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線(xiàn)的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀(guān)察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

P450家族成員2E1(CYP2E1)CYP2E1 ELISA Kit角蛋白3+12抗體包裝5g

P450家族成員2B6(CYP2B6)CYP2B6 ELISA Kit接頭蛋白CrkL抗體包裝100g

P450家族成員27B1(CYP27B1)CYP27B1 ELISA Kit色P450 24A1抗體包裝25g

C氧化亞基Ⅲ(COX3)COX3 ELISA Kit色P450 2R1抗體包裝25g

C(CYCS)CYCS ELISA Kit銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體包裝1g

細(xì)胞間粘附分子5(ICAM5)ICAM5 ELISA Kit鈣周期結(jié)合蛋白抗體包裝5g

細(xì)胞間粘附分子2(ICAM2)ICAM2 ELISA Kit7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框69抗體包裝100g

細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)ICAM1 ELISA Kit銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝25g

細(xì)胞骨架活性調(diào)節(jié)蛋白(ARC)ARC ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框71抗體包裝5g

細(xì)胞分裂周期因子25(CDC25)CDC25 ELISA Kit異染色體同源蛋白1抗體包裝25g

細(xì)胞程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)PDCD1LG1 ELISA Kit銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝5g

硒蛋白P1(SEPP1)SEPP1 ELISA Kit霉抗體包裝1g

無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5A(WNT5A)WNT5A ELISA Kit4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀款包裝250mg

無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3A(WNT3A)WNT3A ELISA Kit凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體包裝5g

無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員10B(WNT10B)WNT10B ELISA Kit色B抗體包裝25g

小單孢菌屬菌種Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP組織蛋白K試劑盒戊型肝炎病IgG抗體國(guó)家參考品

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白H試劑盒巨?。–MV)IgM抗體國(guó)家參考品

平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,超純組織蛋白G自身抗體試劑盒型肝炎病抗體快速檢測(cè)試劑國(guó)家參考品
TB固體培養(yǎng)基粉劑GATA-4/FITC  熒光標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白4IgG小豆蔻油 FCC

GATA-5/FITC  熒光標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白5IgGL-香芹 97%

GATA-6/FITC  熒光標(biāo)記抗GATA結(jié)合蛋白6IgGL-香芹 95%,FG

Gax/FITC  熒光標(biāo)記生長(zhǎng)終止特異性同源盒因IgG杉葉油 natural

GCK/FITC  熒光標(biāo)記抗葡萄糖激IgG(+)-二氫香芹酮 98%

GCN2/FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠蛋白激GCN2蛋白IgG順式二氫香芹酮 97%

Phospho-GCN2 (Thr898) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化蛋白激GCN2蛋白IgG二氫香芹脂 98%

phospho-GCN2 (Thr667) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化蛋白激GCN2蛋白IgG3,4-二-1,2-環(huán)戊二酮 97%