LB冷凍緩沖液

LB冷凍緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品：兔半乳凝集素1(GAL1)試劑盒Anti-CCR2 Antibody絲/蘇蛋白磷酸酶3B抗體
兔降鈣素原(PCT)試劑盒 Anti-CCR10 Antibody蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移酶1α抗體
兔拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子(AATF)試劑盒Anti-CCR2 Antibody泛素連接酶抗體
兔泛素分解酶(DUB)試劑盒 Anti-CCR1 AntibodyPGBD3蛋白

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件  4℃,6個(gè)月

用途  保存細(xì)菌的培養(yǎng)基

注意事項(xiàng)  無菌溶液。主要由LB培養(yǎng)基、硫酸銨、甘油等組成,經(jīng)過濾除菌處理。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

組織金屬蛋白抑制因子2(TIMP2)TIMP2 ELISA Kit磷化Bax抗體包裝250mg

組織金屬蛋白抑制因子1(TIMP1)TIMP1 ELISA Kit磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體包裝25ml

組織蛋白Z(CTSZ)CTSZ ELISA Kit磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體包裝5ml

組織蛋白S(CTSS)CTSS ELISA Kit磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體包裝1g

組織蛋白L(CTSL)CTSL ELISA Kit磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體包裝5g

組織蛋白K(CTSK)CTSK ELISA Kit肌動(dòng)蛋白樣蛋白6A抗體包裝100g

組織蛋白G(CTSG)CTSG ELISA Kit磷化紅陰離子交換蛋白1抗體包裝25g

組織蛋白D(CTSD)CTSD ELISA Kit磷化紅陰離子交換蛋白1抗體包裝5g

組織蛋白A(CTSA)CTSA ELISA Kit障礙自整合蛋白BAF抗體包裝200mg

組蛋白脫乙?；?/span>4(HDAC4)HDAC4 ELISA Kit磷化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體包裝1g

組蛋白脫乙酰基2(HDAC2)HDAC2 ELISA Kit磷化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體包裝1g

組蛋白脫乙酰基1(HDAC1)HDAC1 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝250mg

組蛋白H4(H4)H4 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝1g

組蛋白H3(H3)H3 ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝5g

組蛋白H2B(H2B)H2B ELISA Kit磷化B-Raf抗體包裝1g

二磷腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體干擾α14(IFNα14)MK 2206 dihydrochloride 是一種口服有效的 Akt 變構(gòu)抑制劑，抑制 Akt1/Akt2/Akt3 的 IC50 分別為 5 nM/12
LB冷凍緩沖液factor VIII/FITC  熒光標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原IgG腺-5′-三二鈉鹽，三水 98%

factor X III /FITC  熒光標(biāo)記ⅩⅢIgG三脫氧腺鈉鹽 98%

FADD/FITC  熒光標(biāo)記Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白IgG三脫氧腺鈉鹽溶液 dATP,0 mM 溶液, pH 7.0

FADD/FITC  熒光標(biāo)記Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白IgG胞-5'-三二鈉鹽(CTP)  95%

Phospho-FADD (Ser191) Mouse Specific /FITC  熒光標(biāo)記兔抗小鼠化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白IgG腺-3'，5'-環(huán) 99%

Phospho-FGF Receptor 1 (Tyr766) /FITC  熒光標(biāo)記化性成纖維生長因子受體1IgG三脫氧胞鈉鹽 98%

P-FADD/FITC  熒光標(biāo)記化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白IgG三脫氧鳥鈉鹽 98%

FAF1/FITC  熒光標(biāo)記Fas相關(guān)1因子IgG2'-脫氧胸-5'-三三鈉,二水 96%