詳細介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
微量法 | 100管/48樣 | AS6321205 |
商品介紹:
商品介紹 測定意義: 淀粉水解酶,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-AL (EC 3.2.1.1)隨機催化淀粉中α-1,4-糖苷鍵水解,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時使淀粉的粘度降低,因此又稱為液化酶。 測定原理: 淀粉水解酶催化淀粉水解生成還原糖,還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì),在540 nm有吸收峰;通過測定540 nm吸光度增加速率,計算淀粉酶活性。α-AL耐熱,但是β-淀粉酶可在70℃鈍化15min。因此粗酶液經(jīng)過70℃鈍化15min,就只有α-AL能夠催化淀粉水解。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強。且特異性強,不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
止瀉木子(標準品)英文名: H-Pyr-OH人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病膜糖蛋白2抗體包裝5g
枳殼(標準品)英文名: Z-Pyr-OHBeta基己糖苷beta亞基蛋白B鏈抗體包裝1g
枳實(橙)(標準品)英文名: DL-m-TyrosineHEXIM2蛋白抗體包裝250mg
制何首烏(標準品)英文名: H-Sar-OMe·HCl3'-5'外切1蛋白抗體包裝10g
腫節(jié)風(草珊瑚)(標準品)英文名: L-Isoleucinol型肝炎病NS5B抗體包裝100g
重樓(云南重樓)(標準品)英文名: L-Leucinol缺氧誘導(dǎo)基因1C蛋白抗體包裝25g
重樓皂苷II(標準品)英文名: Boc-LeucinolHEG同源蛋白1抗體包裝500g
重樓皂苷I(標準品)英文名: L-Phenylalaninol人腫瘤抑制蛋白抗體包裝1g
重樓皂苷VII(標準品)英文名: L-TryptophanolHemk基轉(zhuǎn)移家族1號蛋白抗體包裝5g
重樓皂苷VI(標準品)英文名: Fmoc-ValinolHemk基轉(zhuǎn)移家族2號蛋白抗體包裝1g
珠子草(標準品)英文名: D-ValinolHEN1基轉(zhuǎn)移同源蛋白1抗體包裝250mg
豬膽粉(標準品)英文名: L-Phenylglycinol缺氧誘導(dǎo)基因2蛋白抗體包裝5g
豬苓C英文名: BOC-L-Prolinol乙肝病衣殼蛋白抗體包裝25g
豬去氧膽(標準品)英文名: 2-Amino-1,3-propanediol 型肝炎病1a基因型NS5蛋白抗體包裝5g
豬牙皂(標準品)英文名: N-Methyl-d-Aspartic Acid戊型肝炎病抗體包裝50g
鮑曼/醋鈣復(fù)合不動桿菌Acinetobacter│baunannii/calcoaceticus complex 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品流感B病試劑盒10-氧基;10-Methoxy
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR流感B病試劑盒基丁香;Methyl eugenol
暫無Haematobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品流感A病抗體IgG 巨豆三烯;Tabanone
α淀粉酶測試盒100管/48樣稻梨孢 香蘭基丁羽狀斑駁病Elisa
赤霉 Raloxifene HCl輕型黃邊病Elisa
核黃德沃斯氏 鹽酸喹那普烯酰-CoA水合Elisa
豇豆慢生根瘤 Fmoc-L-4-苯淀粉Elisa
蘇云金芽孢桿 2-氨基-6-溴NAD-蘋果酸Elisa
土壤伯克氏 1-O-癸基-β-D-麥芽糖苷NADP-蘋果酸Elisa
黑曲霉 3--5-甲氧基碳酸酐βElisa
亮白曲霉 3-甲基氨基轉(zhuǎn)移Elisa
黃曲霉 4-(2-三氟氧基)天門冬氨基轉(zhuǎn)移Elisa
黃色毛霉 (R,R)-(+)-雙(α-甲芐基)鹽酸鹽L(+)-3-羥脂酰脫氫Elisa
小紅酵母 基環(huán)三氧烷NADP-依賴蘋果酸脫氫Elisa
香栓 2--5-(三氟甲基)苯甲脫鎂葉綠AElisa
少根根霉原變種 糖精鈉 水合物7-羥基Elisa
芽孢桿 7,7-二二環(huán)[4.1.0]庚烷Elisa
枯草芽孢桿 3-溴4-苯蘋果酸脫氫Elisa
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。