乙醇酸氧化酶提取試劑

乙醇酸氧化酶提取試劑公司正在銷售的產(chǎn)品：兔松弛素/胰島素樣肽受體1(RXFP1)試劑盒Anti-HERC5 Antibody轉(zhuǎn)錄生長因子SP1抗體
兔核糖體蛋白L26(RPL26)試劑盒Anti-HEXB Antibody內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗體
兔B激活抗原B7-2(LAB7-2/CD86)試劑盒Anti-HFE Antibody色相關(guān)蛋白3抗體
兔血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/K

產(chǎn)品分類：細(xì)胞組分分離

儲存條件：4℃,避光,12個月

用途：用于乙醇酸氧化酶的提取。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

（標(biāo)準(zhǔn)品） Sulforhodamine B白喉酰生物合成樣蛋白2抗體包裝25g

羥煙（標(biāo)準(zhǔn)品） Sulforhodamine BNotch信號通路Delta樣配體3抗體包裝5g

羥（標(biāo)準(zhǔn)品） Rhodamine 110 chloride動力蛋白激活蛋白2抗體包裝1g

草(標(biāo)準(zhǔn)品) Rhodamine 123視神經(jīng)相關(guān)蛋白/早老結(jié)合蛋白抗體包裝25g

青霉G(標(biāo)準(zhǔn)品) Trimebutine baseDHX螺旋抗體包裝5g

琥珀單酯（標(biāo)準(zhǔn)品） 6-Carboxytetramethylrhodamine轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DISP2抗體包裝10g

琥珀鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） 6-TAMRA, SE DNA聚合α2抗體包裝50g

（標(biāo)準(zhǔn)品） Ovalbumin/Egg albumins短鏈脫氫/還原家族7B抗體包裝100g

氫噻（標(biāo)準(zhǔn)品） Miltefosine膜二肽3抗體包裝25g

氫達(dá)那新(標(biāo)準(zhǔn)品) Miltefosine雙特異性磷13抗體包裝500g

氫后馬托品（標(biāo)準(zhǔn)品） 1-Naphthyl PP1DIM-7蛋白抗體包裝1g

氫加蘭他敏（標(biāo)準(zhǔn)品） Aliskiren hemifumarate核糖核Dicer抗體包裝25g

氫力克敏（標(biāo)準(zhǔn)品） Epothilone D內(nèi)皮和平滑肌衍生的神經(jīng)纖毛蛋白抗體包裝5g

氫右沙芬（標(biāo)準(zhǔn)品） Calcium levofolinate含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族2抗體包裝100ml

氫樟柳堿（標(biāo)準(zhǔn)品） Afatinib dimaleate /BIBW2992-MA2DNA連接1抗體包裝500ml

草本枝孢Cladosporium│herbarum 質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR蝸牛同源物2試劑盒石松靈堿;Lycodoline

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品蝸牛同源物1試劑盒山羊豆堿;Galegine

節(jié)桿菌屬Arthrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%,BR胃粘膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤抗體試劑盒藤子;Embelin
乙醇酸氧化酶提取試劑PAK2 /FITC  熒光標(biāo)記p21激活激2IgG

Phospho-PAK2 (Ser20) /FITC  熒光標(biāo)記化p21激活激2IgG

PAK4/FITC  熒光標(biāo)記p21激活激4IgG

Phospho-PAK4 (Ser474)/PAK5 (Ser602)/PAK6 (Ser560) /FITC  熒光標(biāo)記化p21激活激4、5、6IgG

PAK7/PAK5/MBT/FITC  熒光標(biāo)記抗激活激PAK7/PAK5IgG

-phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) /FITC  熒光標(biāo)記抗化核糖體S6蛋白激IgG

Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) /FITC  熒光標(biāo)記化核糖體S6蛋白激β2IgG

phospho-P70 S6 Kinase beta (Ser371)/FITC  熒光標(biāo)記化核糖體S6蛋白激IgG