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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
紅細胞稀釋液 | 100ml | FS-R6677 |
產(chǎn)品分類:細胞染色
儲存條件:室溫,12個月
用途:用于紅細胞計數(shù)
注意事項:由檸檬酸鈉,甲醛等組成。
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfaquinoxaline接頭蛋白Gab 1抗體包裝5g
駱駝篷子(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfalozine sodium磷化糖原合激3α抗體包裝25g
落花生枝葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Tiamulin磷化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗體包裝5g
落新婦苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Cesium iodide糖原合激-3β抗體包裝100g
麻楓樹B(標(biāo)準(zhǔn)品) 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinone抗粘附多肽抗體包裝25g
(草)(標(biāo)準(zhǔn)品) Dimethyl sulfoxide腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機制相關(guān)蛋白1抗體包裝500g
(中)(標(biāo)準(zhǔn)品) Dodecyltrimethylammonium chloride神經(jīng)膜糖蛋白M6a包裝5g
根(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl ArachidateG蛋白偶聯(lián)受體101抗體包裝250mg
麻醉椒苦 Polyamide胰高血糖樣肽-1受體/GLP-1受體抗體包裝1g
麻醉椒 Polyamide糖磷脂酰肌抗體包裝5g
馬鞭草(標(biāo)準(zhǔn)品) Polyamide磷化gp130抗體包裝25g
馬勃(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium phosphate dibasic dihydrateS轉(zhuǎn)移ζ1抗體包裝5g
馬齒莧(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium sulfate anhydrous甘-N-?;D(zhuǎn)移抗體包裝25g
馬兜鈴(北馬兜鈴)(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium sulfate anhydrous甘-N-?;D(zhuǎn)移樣1抗體包裝5g
馬兜鈴A(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium bicarbonate 轉(zhuǎn)運蛋白G3PP抗體包裝1g
青霉菌Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng) 前動力蛋白1試劑盒白綿馬AA;Albaspidin AA
宇佐曲霉Aspergillus usamii 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品前病整合位點1試劑盒綿馬ABA;Filixic acid
奇跡束絲放線菌Actinosynnema│mirum 質(zhì)量規(guī)格:>900 mcg/mg,BR,可用于培養(yǎng)葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4試劑盒麻醉椒苫;methysticin
紅細胞稀釋液Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗原規(guī)格: 0.5mg
NF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型神經(jīng)纖維瘤抗原規(guī)格: 0.5mg
NFATc1 活化T細胞核因子1蛋白規(guī)格: 0.5mg
phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 磷suan化細胞核因子/磷suan化k基因結(jié)合核因子抗原規(guī)格: 0.5mg
NF-κBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB) 細胞核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗原規(guī)格: 0.5mg
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。