商品屬性:
商品介紹:
測(cè)定意義: 測(cè)定對(duì)象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測(cè)血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。 測(cè)定原理: 在酸性環(huán)境下,抗氧化物質(zhì)還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ的能力反映了總抗氧化能力。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
干擾α(IFNα)英文名:IFNα ELISA Kit半胱蛋白抑制劑6抗體包裝5g
肝脂(LIPC)英文名:LIPC ELISA Kit碳酐相關(guān)蛋白/腦蛋白10抗體包裝1g
肝再生擴(kuò)展生長(zhǎng)因子(GFER)英文名:GFER ELISA Kit白介-18受體α鏈抗體包裝5g
肝(HPA)英文名:HPA ELISA Kit轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF抗體包裝1g
肝結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HBEGF)英文名:HBEGF ELISA KitT淋巴CD1抗體包裝25g
肝輔因子Ⅱ(HCⅡ)英文名:HCⅡ ELISA Kit磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體包裝5g
肝腎骨堿性磷(ALPL)英文名:ALPL ELISA Kit網(wǎng)格蛋白重鏈抗體包裝1g
肝配蛋白B受體3(EPHB3)英文名:EPHB3 ELISA Kit透明質(zhì)介導(dǎo)游走受體抗體包裝100g
肝配蛋白B2(EFNB2)英文名:EFNB2 ELISA Kit2號(hào)染色體開放閱讀框24抗體包裝1g
肝癌源性生長(zhǎng)因子(HDGF)英文名:HDGF ELISA Kit2號(hào)染色體開放閱讀框60抗體包裝250mg
肝X受體α(LXRα)英文名:LXRα ELISA Kit磷化周期依賴性激7抗體包裝25g
甘油醛-3-磷脫氫(GAPDH)英文名:GAPDH ELISA Kit磷化周期依賴性激9抗體包裝5g
甘露糖受體C2(MRC2)英文名:MRC2 ELISA Kit磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體包裝5g
甘露糖受體C1(MRC1)英文名:MRC1 ELISA Kit磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體包裝1g
甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)英文名:MBL ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝250mg
香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,培養(yǎng)級(jí)載脂蛋白B48試劑盒原七葉皂苷元;Protoaescigen
植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白B100試劑盒鹽;EMetine Hydroc
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31,BR,可用于培養(yǎng)載脂蛋白A5試劑盒乙氧基血根堿;Ethoxysanguin
總抗氧化能力(FRAP法)測(cè)試盒50管/48樣大腸埃希 阿他定白抗原B27Elisa
巨大芽孢桿 4-咪唑類白抗原B1502Elisa
地衣芽胞桿 3-苯基芐基溴抗RNA聚合III抗體Elisa
謝瓦曲霉 Nα-Fmoc-Nε-生物-L-賴還原型輔ⅠElisa
草假單胞 Y-27632信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子4Elisa
弗氏鏈霉 [4-(反-4-N-基環(huán)己基)苯基]甲型肝炎病IgM抗體Elisa
木菇屬 1-Boc-3-戊型肝炎病IgM抗體Elisa
瓜果腐霉 六硝基鈷(III)酸鈉幽門螺桿抗體Elisa
釀酒酵母 四苯基卟啉鎂幽門螺桿抗原Elisa
優(yōu)氈被 Cy5-N-羥基琥珀酰亞酯黃熱病抗原Elisa
黃色孢鏈霉 Cy5黃熱病IgG抗體Elisa
克羅諾桿屬 N-BOC-4-氧代-3-吡咯烷甲酸乙酯凋亡相關(guān)蛋白TFAR19Elisa
嗜熱側(cè)孢霉 鹽酸噻加賓抗鼠抗體Elisa
羅倫隱球酵母 5-溴-1,3-二氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯流行性腦膜炎球抗原Elisa
開菲爾乳桿 二二羰基雙(三苯基膦)釕(II)圍脂滴蛋白Elisa