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谷氨酸合成酶(GOGAT)測(cè)試盒50管/48樣

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更新時(shí)間:2022-06-16 14:42:09瀏覽次數(shù):167

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號(hào) AS632190 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 檢測(cè)方法 紫外分光光度法
谷氨酸合成酶(GOGAT)測(cè)試盒50管/48樣公司正在出售的產(chǎn)品:B型流感病蛋白抗體anti-Rarres2/TIG2/FITC 熒光標(biāo)記視黃受體應(yīng)答蛋白2抗體IgG
人類狀瘤病16-E7抗體Anti-Rarres3/TIG3/Chemerin/FITC 熒光標(biāo)記視黃受體應(yīng)答蛋白3抗體IgG
跨膜蛋白絲1抗體Anti-rInsulin /HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記抗重抗體IgG
肺癌癌基因蛋白

詳細(xì)介紹

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

谷氨酸合成酶(GOGAT)測(cè)試盒50管/48樣

檢測(cè)方法

紫外分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格

50管/48樣

產(chǎn)品貨號(hào)

AS632190

商品介紹:

測(cè)定意義:                          

GOGAT廣泛分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同構(gòu)成GS/GOGAT循環(huán),參與氨同化的調(diào)控。GOGAT分為以NADH為還原劑的NADH-GOGAT和以鐵氧還蛋白為還原劑的Fd-GOGAT。Fd-GOGAT主要存在于葉綠體基質(zhì)中,與光合作用和光呼吸有關(guān),主要同化NO3-還原和光呼吸產(chǎn)生的NH4+。

測(cè)定原理:

Fd-GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸,形成兩分子的谷氨酸,谷氨酸脫氫酶催化谷氨酸的脫氫反應(yīng),同時(shí)產(chǎn)生NADH,使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測(cè)定吸光值。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。

自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

NAD+和NADH的提?。?/span>

1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取

NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span>

NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,

混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span>

NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性

提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿

性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

ADH測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。

3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。

4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。

注意:空白管只需測(cè)定一次。

注意事項(xiàng):

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。

4-[2-(5-基吡-2-?;?乙基]磺酰...英文名: Quetiapine Fumarate20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框194抗體包裝250g

4-[2-(5--2-氧基酰)-乙基]-磺...英文名: Quetiapine Fumarate4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框32抗體包裝50g

4-基安替比林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Raltegravir K5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框20抗體包裝100g

4-羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Raltegravir胱抑D/半胱蛋白抑制劑D抗體包裝25g

4-羥基芐;對(duì)羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Rapamycin(Sirolimus)胱抑8/半胱蛋白抑制劑8抗體包裝10g

4-羥基間二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Rapamycin(Sirolimus)胱抑9/半胱蛋白抑制劑9抗體包裝50g

4-異丁基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Rasagiline Mesylate胱抑S/半胱蛋白抑制劑S抗體包裝1g

4-[2-(5--2-氧基酰)-乙基]-磺...英文名: Resveratrol煙堿型乙酰受體α3抗體包裝25g

4-差向四環(huán)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Resveratrol3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框33抗體包裝5g

5'-脫氧-5-胞苷(5’-DFCR)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Retigabine Base3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框39抗體包裝25g

5-基楊,沙秦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Retigabine3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框59抗體包裝5g

5-基-2,4-戊二烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ribavirin5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框51抗體包裝1g

5-氮胞苷/阿扎胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ribavirin3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框70抗體包裝5g

5-基蜂蜜曲霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ribostamycin Sulfate2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框68抗體包裝1g

5-羥基色(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Rifabutin 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框47抗體包裝1g

酵母菌Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)血小板膜糖蛋白Ⅳ試劑盒異甘草;Isoliquiritigen

原小單孢菌屬菌種Promicromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa試劑盒柚皮苷;Naringin

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR血小板激活因子乙酰解2,質(zhì)試劑盒延胡索乙;Tetrahydropalm
谷氨酸合成酶(GOGAT)測(cè)試盒50管/48樣臭曲霉 2,3,6-三氟芐生物羧化Elisa

熱帶假絲酵母 2-溴-3-羥基-6-音猬因子Elisa

微紅微球?qū)?/span> 4-甲氧基-2-硝基-苯甲蓋他病Elisa

白僵 1-苯基-1,2,3,4-四氫異喹啉Salusinβ蛋白Elisa

地衣芽孢桿 6-硝基-1,2-苯并異噻唑啉-3-酮 1,1-二氧化物可溶性因子受體Elisa

阿舒假囊酵母 N-乙?;?3-甲β微球蛋白Elisa

米曲霉 4-三糖類抗原50Elisa

泡盛曲霉變種 5-硝基噻吩-2-羧酸糖類抗原199Elisa

植物乳桿 3-芐氧基苯甲酰肼糖類抗原153Elisa

核盤 硅化鎂糖類抗原242Elisa

溶血不動(dòng)桿 順-6-壬烯糖類抗原724Elisa

短穩(wěn)桿 1-環(huán)戊烯基乙prestin 蛋白Elisa

異常漢遜酵母 2,3-二氫苯并-5-酸番茄紅Elisa

枯草芽孢桿 4-溴-2-羥基甲酯色P45011B1Elisa

黑根霉 6-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉色P45011B2Elisa

 


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