化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
產(chǎn)品分類：骨組織染色
儲存條件：室溫,避光,12個月
用途：又稱戈德納三色染色液,主要用于骨組織染色。
注意事項：可不脫鈣染色,可用MMA塑料包埋,脫塑后直接染色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Goldner三色染色液 | 6×50ml | FS-R6699 |
配制與標(biāo)定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
桑辛;桑根皮（標(biāo)準(zhǔn)品) Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)胰高血糖樣肽2受體抗體包裝1g
桑葉（標(biāo)準(zhǔn)品） N-Methyliminodiacetic Acid生長休止特定蛋白1抗體包裝5g
桑枝（標(biāo)準(zhǔn)品） Nitrilotriacetic Acid Disodium Saltγ-谷酰轉(zhuǎn)移輕鏈1抗體包裝25g
沙蟾精-3-辛二半酯 N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acidγ1基丁受體α5/GABRα5抗體包裝5g
沙棘（標(biāo)準(zhǔn)品） Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic AcidG蛋白激活內(nèi)向通道1抗體包裝200mg
沙棘膏（標(biāo)準(zhǔn)品） TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]G蛋白激活內(nèi)向通道3抗體包裝100g
沙苑子（標(biāo)準(zhǔn)品） Dimethylsulfonazo IIIG蛋白偶聯(lián)受體48抗體包裝25g
沙苑子苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfonazo III 糖基轉(zhuǎn)移GLT8D2抗體包裝500g
沙苑子苷A（標(biāo)準(zhǔn)品） 3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate高爾基體外周膜蛋白p65抗體包裝100g
砂仁(陽春砂)（標(biāo)準(zhǔn)品） 2,2'-Dihydroxyazobenzene核因子GCNF/維受體相關(guān)受體抗體包裝500g
山茶甙A StilbazoG蛋白轉(zhuǎn)錄因子α2/Gα t2抗體包裝5g
山茶甙B Lumogallion 脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝100mg
山茶苷A Disodium Bathocuproinedisulfonate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝500mg
山豆根（標(biāo)準(zhǔn)品） Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Disodium Salt Hydrate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝1g
山風(fēng)（標(biāo)準(zhǔn)品） Bathocuproine (purified by sublimation)轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體包裝1g
鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%腦腸肽試劑盒3-O-咖啡酰奎寧;3-O-caffe
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品囊蟲病抗體試劑盒輪環(huán)藤寧;Cyclen
靈芝(赤芝，紅靈芝)Ganoderma│lucidium 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP31難辨梭狀芽孢桿菌B試劑盒龍膽山;Bellidifolin
Goldner三色染色液ROCK2 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2) Rho相關(guān)蛋白激mei2抗原規(guī)格： 0.5mg
RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受體RXRα抗原規(guī)格： 0.5mg
S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-磷suan山脫氫mei抗原規(guī)格： 0.5mg
S0B S0B蛋白抗原規(guī)格： 0.5ml
S0B(S0 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S0B蛋白多肽規(guī)格： 0.5mg
化工儀器網(wǎng)