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詳細(xì)介紹
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321299 |
商品介紹：
測定意義 土壤亞硝酸還原酶是反硝化作用中的關(guān)鍵酶之一，參與亞硝酸鹽至NO的還原反應(yīng)，它的活性反映了生物降解過程中氮素的轉(zhuǎn)化效率，為氮素轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究提供一定的依據(jù)。 測定原理 亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。 需自備的儀器和用品 天平、、研缽、可見分光光度計(jì)、水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿。 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時(shí)加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
黑曲霉APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體Human LRCH1 ELISA Kit豬巨噬遷移抑制因子(糖基化抑制因子)(MIF)免疫試劑盒
*蟲擬蠟菌甲胎蛋白單克抗體（包被）Human LPXN ELISA Kit豬金屬硫蛋白(MT)免疫試劑盒
瓦克青霉甲胎蛋白單克抗體(檢測)Human LRAT ELISA Kit豬結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒
印度不動桿菌ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體Human LIN7A ELISA Kit豬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒
Bacillus 芳香烴受體抗體Human LMF2 ELISA Kit豬角化生長因子(KGF)免疫試劑盒
嗜鹽堿堿芽孢桿菌吸引抗體Human LIN28B ELISA Kit豬降鈣原(PCT)免疫試劑盒
球孢白僵菌腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體Human LITAF ELISA Kit豬降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
柔嫩艾耳球蟲蛋白激B2Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit豬堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒
平菇血管生成2抗體Human Liprin alpha 1 ELISA Kit豬甲狀腺(T4)免疫試劑盒
金針菇芳香化/色P450/雌激合成抗體Human LIV-1 ELISA Kit豬低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒
釀酒酵母腺苷A2A受體抗體Human LIN28B ELISA Kit豬激敏感性脂肪(HSL)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌蛋白激A錨定蛋白95抗體Human LMBR1L ELISA Kit豬激動異構(gòu)/分裂MB(CKMB)免疫試劑盒
曲霉頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體Human LMF2 ELISA Kit豬基質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒
*樺褐孔菌去整合樣金屬蛋白8抗體Human LIN7A ELISA Kit豬基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒
狀鞘單胞菌芳香乙酰脫乙?；鶚拥鞍?/span>3抗體Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit豬基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)免疫試劑盒
三孢布氏霉ACN9蛋白抗體Human LHPP ELISA Kit豬基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒
榛針孢酵母Nematospora│coryli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 補(bǔ)體蛋白9試劑盒紫莖女貞苷A
阮繼生氏菌Ruania│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR補(bǔ)體蛋白5試劑盒正丁
pr1.01739資源名稱: 皮氏羅爾斯通氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC 補(bǔ)體蛋白4試劑盒梓
土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒50管/24樣膠孢 4-甲基-3(2H)-噠酮胰淀Elisa
球孢白僵 5-甲基-5-基-1,3-二惡烷-2-酮肝磷脂酰乙Elisa
亮白曲霉 12-溴-1-十二烷NADPH氧化2Elisa
蘇云金芽孢桿蘇云金亞種 2,2-二氟維生CElisa
類干酪乳桿 芐氧羰基-D-天冬 4-叔丁酯一水物肝核因子1βElisa
黃綠鏈霉 3-羥基-4-乙酮胰多肽Elisa
金龜子綠僵 4-羥基異喹啉氧化三Elisa
新城疫病 4-吡啶甲脒Caspase-1p20Elisa
變灰青霉 6-異硫酸熒光白介1βp17Elisa
鍺栓孔 4-氨甲基11β羥類固脫氫1型Elisa
紅曲霉 乙酸對叔丁基環(huán)己酯抗雙鏈DNA抗體;天然DNA抗體Elisa
細(xì)鏈格孢 磺酸酐酯Elisa
滑假絲酵母 1-環(huán)己基3氧代5α類固4脫氫2Elisa
谷棒桿 1H-吲唑-6-羧酸乙酯胰高血糖樣肽1.7-36Elisa
異常漢遜酵母 (3-甲?；?乙酸乙酯胃促生長Elisa
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