詳細介紹
商品介紹:
商品介紹 測定意義堿性蛋白酶是指能夠在堿性條件下水解蛋白質肽鍵的酶類,屬于絲氨酸蛋白酶。此外,該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵,具有轉酯及轉肽的功能。該酶是主要工業(yè)用酶之一,廣泛應用于制藥、絲綢、食品、制革等行業(yè)。測定原理堿性條件下,堿性蛋白酶可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸;酪氨酸進一步還原磷鉬酸生成鎢藍;在680nm有特征吸收峰。實驗中所需儀器及設備可見分光光度計、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
可見分光光度法 | 50管/24樣 | AS6321174 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。且特異性強,不受類SOD物質的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
羅漢果皂苷Ive(標準品)英文名: Dimethyl sulfoxide磷化GATA結合蛋白4抗體包裝1g
羅漢果皂苷V(標準品)英文名: Ethylene glycolGATA結合蛋白6抗體包裝25g
羅漢果皂苷ⅡA2英文名: Glycerol in water for HPLC verificationGLP-1單克抗體包裝5g
羅漢果皂苷ⅢA1英文名: Lithium carbonate顆粒B抗體包裝25g
羅漢果皂苷Ⅲe英文名: Neocuproine hydrochloride monohydrateG蛋白偶聯(lián)受體30抗體包裝5g
羅漢松樹脂-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品)英文名: Potassium bromide神經(jīng)節(jié)苷脂誘導分化相關蛋白2抗體包裝100g
羅通定/左旋延胡索乙/左旋四氫巴馬(標準品)英文名: Arsenazo I Hydrate3-磷甘油脫氫包裝25g
蘿卜硫;萊菔硫烷(標準品)英文名: Sodium sulfate anhydrousGDNF家族受體α-1抗體包裝5g
裸花紫珠(標準品)英文名: Dimethyl sulfone運動神經(jīng)元存活蛋白結合蛋白1抗體包裝1g
絡塞定(標準品)英文名: 1,3-Propanediol葡萄糖轉運蛋白1抗體包裝100mg
絡塞琳(標準品)英文名: DHA葡萄糖轉運蛋白2抗體包裝10mg
絡塞維(標準品)英文名: Dimetridazole磷化糖皮質激受體抗體包裝100g
絡石苷(標準品)英文名: Penicillin V potassium saltG蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體包裝1g
絡石藤(標準品)英文名: 2-NP-AOZγ連環(huán)蛋白/Catenin γ /γ鏈接抗體包裝5g
絡緦(標準品)英文名: SulfacetamideG1基丁A型受體相似蛋白2抗體包裝1g
海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│marina 質量規(guī)格:purity>99.5%,EP6,BR前顆粒蛋白試劑盒貓眼草黃;Chrysospleneti
鏈單孢菌屬菌種Streptomonospora│sp. 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品前膠原C內肽增強子1試劑盒木栓;Friedelin
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質量規(guī)格:>98.5%,BR前膠原C端肽試劑盒白綿馬AP;Albaspidin AP
堿性蛋白酶測試盒50管/24樣伴放線團聚桿 4--3-三氟甲氧基苯甲心肌肌鈣蛋白CElisa
枯草芽孢桿 4--3-三氟甲氧前列腺癌抗原3Elisa
膠孢 3--4-α-甲?;鼸lisa
堿湖迪茨氏 3-外雙環(huán)氨基[2.2.1]庚烷-2-外羧基酸晶狀體上皮源性生長因子Elisa
雜色曲霉 3-內雙環(huán)氨基[2.2.1]-5-嗯-2-內羧基酸前列腺特異性膜抗原Elisa
異配囊接霉 乙酰乙酰芐(AABA)氨肽NElisa
枯草芽孢桿 2-乙基丁酸脂酰Elisa
栗酒裂殖酵母 1-萘甲酰精脫亞氨Elisa
細鏈格孢 2,5-二氟-4-甲氧基苯甲粘蛋白4Elisa
柑橘青霉 1-[2-(trifluoromethyl)phenyl]propan-1-ol粘蛋白20Elisa
光帽鱗傘 3,5-二甲氧基芐溴粘蛋白16Elisa
肉桂球形孢囊 L-酪氨鹽酸鹽表皮生長因子樣蛋白6抗體Elisa
短小芽孢桿 3-溴-4,5-二氟苯唾液酸結合Ig樣凝集7Elisa
大腸桿 4′-羥基-2′-乙酮森林腦炎IGG抗體Elisa
巨獸芽孢桿 [4-(tert-butylcarbamoyl)-3-fluoro-phenyl]boronic a森林腦炎IGM抗體Elisa