B5培養(yǎng)基

B5培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：兔前列腺素F(PGF)試劑盒Anti-ELAVL4 AntibodyRho GTP酶激活蛋白29抗體
兔嗅素4(OLFM4)試劑盒Anti-ELF3 Antibody食道癌抑制生長蛋白抗體
兔紅生成素受體(EPOR)試劑盒 Anti-ELF1 AntibodyRAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體
兔半乳凝集素12(GAL12)試劑盒Anti-EMD Antibody雄受體相

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲存條件：4℃,6個月

用途：主要用于培養(yǎng)雙子葉植物，尤其是木本植物的生長

注意事項：主要由硝酸鉀、氯化鈣、硫酸鎂、磷酸鹽等組成，硝酸鉀工作濃度為2575.5mg/L、硫酸鎂工作濃度為246.5mg/L、硫酸an工作濃度為134mg/L。該試劑特點是銨鹽含量較低，硝酸鹽和硫胺素含量較高

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

維丁酯/丁維 Gemcitabine HCl周期蛋白依賴性激抑制蛋白3抗體包裝25g

洛伐他 Gemifioxacin Mesylate角蛋白42包裝5g

洛他派 Gemifioxacin MesylateCD105抗體包裝1g

馬來 Sodium cholate半胱蛋白蛋白-7抗體包裝5g

馬來桂哌齊特 Glucagon AcetateCD8/CD8-β抗體包裝25g

馬來 Gonadorelin Acetate周期蛋白依賴性激CABLES2抗體包裝5g

 Granisetron HCl兔抗雞IgY抗體包裝1g

托宗 Granisetron HCl20號染色體開放閱讀框128抗體包裝25g

莫索定 Hydrochlorothiazide色P450ⅡE1抗體包裝5g

那屈肝鈣 HydrochlorothiazideB-淋巴趨化因子抗體包裝1g

奈比洛爾鹽鹽;奈必洛爾 Hydrocortisone Acetate分裂周期蛋白23抗體包裝25g

 Hydrocortisone Acetate結(jié)腸和肝腫瘤高表達蛋白抗體包裝5g

可地爾 IdarubicinHCl周期蛋白依賴性激調(diào)節(jié)亞基1抗體包裝25g

莫 Imatinib Mesylate間粘附分子-1抗體包裝5g

群 Imatinib Mesylate間粘附分子1抗體包裝25g

: ATCC39140資源名稱: 檸檬泛菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%氧化型試劑盒原花青;Procyanidin

豪氏變形菌Proteus│hauseri 質(zhì)量規(guī)格：含量測定氧化高密度脂蛋白試劑盒原兒茶;Protocatechuald

蜜環(huán)菌Armillaria│mellea (Vahl) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR氧化低密度脂蛋白抗體試劑盒原兒茶;3,4-Dihydroxybe
B5培養(yǎng)基MAdCAM-1/FITC  熒光標記粘膜血管定居因子IgG溴化銀 98%

MAdCAM-1/Biotin  生物標記粘膜血管定居因子IgG玉淀粉 藥用級

Mafa/FITC  熒光標記v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌因同源物A（）IgG碳二酯 99%

MAFbx/Fbx32/Atrogin-1/FITC  熒光標記泛蛋白連接IgG碳二酯（DMC） 98%

MAG-a/L-MAG /FITC  熒光標記髓鞘相關(guān)糖蛋白-aIgG碳二酯（DMC） 99%

MAG-a/b /FITC  熒光標記髓鞘相關(guān)糖蛋白a/bIgG2,7-二溴芴 98%

MAGE-1/HLA-A1 protein /FITC  熒光標記黑瘤抗原-1IgG多聚 AR,95.0%

MAGE-A4/FITC  熒光標記黑色瘤相關(guān)抗原4IgG多聚 96%

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。