詳細介紹
產(chǎn)品分類:結締染色
儲存條件:室溫,避光,24個月
用途:肌纖維、纖維素的染色,尤其適用于橫紋肌/平滑肌染色
注意事項:染色液采用自然氧化法使其成熟。橫紋肌的橫紋、纖維素、胞核、紅細胞、神經(jīng)膠質纖維呈深藍色,膠原纖維、軟骨呈棕紅色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Mallory PTAH染色液 | 100ml | FS-R6701 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
山柰(標準品) meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid高爾基體轉運蛋白1A抗體包裝100g
山柰-3-O-α-L-吡喃阿伯糖苷 Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt自主生長因子1B抗體包裝25g
山柰-3-O-槐二糖-7-O-葡萄糖苷 Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium SaltGLCNE蛋白抗體包裝500g
山柰-3-O-龍膽二糖苷 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane Tetrahydrochloride半乳糖凝集9抗體包裝1g
山柰-3-O-蕓香糖苷(標準品) Bis(2-ethylhexyl) Adipate富含亮蛋白LRP130抗體包裝5g
山柰-3-槐二糖-7-鼠李糖苷 3,4-Benzopyrene (purified by sublimation)蛋白轉運抑制劑GBF1抗體包裝250g
山香圓葉(標準品) Bis(phenylacetyl) Disulfide高爾基體膜蛋白GP73抗體包裝100mg
山藥(標準品) Benzopurpurine 4B葡萄糖轉運蛋白1抗體包裝1g
山銀花(灰氈毛忍冬)(標準品) Pentamethoxy RedG蛋白結合蛋白2抗體包裝5g
山楂(山里紅)(標準品) Benzyl OrangeG蛋白結合蛋白2抗體包裝10MG
山楂(山楂)(標準品) Bromochlorophenol Blue型肝炎病-NS3反轉錄激活蛋白2抗體包裝50mg
山楂,馬斯里(標準品) Ethyl Orange間隙連接蛋白47抗體包裝1g
山楂葉(山里紅)(標準品) 4-Ethoxychrysoidine Hydrochloride神經(jīng)膠質蛋白(肝癌相關基因2)抗體包裝250mg
山芝麻(標準品) DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]糖蛋白磷脂D抗體包裝100g
山梔苷酯(標準品) 2,3-NaphthalenedialdehydeG蛋白偶聯(lián)受體49抗體包裝25g
: HBUM70109資源名稱: 鏈霉菌 質量規(guī)格:>98.5%,BP2007內(nèi)質網(wǎng)蛋白29試劑盒靈芝A;Ganoderic acid
圍小叢殼Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪試劑盒內(nèi)酯;Wilforlide A
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規(guī)格:>99%內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑試劑盒龍血C;Cochinchinenin
Mallory PTAH染色液CXCL16 peptide CXC趨化因子16抗原規(guī)格: 0.5mg
Sema3A (semaphorin 3A) 臂板蛋白3A(多肽)規(guī)格: 0.5mg
Sema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原規(guī)格: 0.5mg
SFRP1(Secreted frizzled related protein 1) 分泌型卷曲相關蛋白1抗原規(guī)格: 0.5mg
SGLT1(sodium-glucose cotransporter1) 鈉-葡萄糖共轉運載體1抗原規(guī)格: 0.5mg