詳細介紹
商品介紹:
商品介紹 測定意義: GLS(EC 3.5.1.1)是酰胺基水解酶,催化天冬酰胺水解成谷氨酸和氨,在氮素代謝中具有重要調(diào)控作用,尤其是調(diào)節(jié)游離氨含量和尿素代謝。 測定原理: GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨,利用奈氏試劑檢測氨增加的速率,即可計算其酶活性。 需自備儀器和用品: 臺式離心機、酶標儀、水浴鍋、96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、冰和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
微量法 | 100管/96樣 | AS632191 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強。且特異性強,不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
5-三基(標準品)英文名: Rifabutin CD83抗體包裝250mg
5-硝基糠二乙酯(標準品)英文名: Rifapentine17號染色體開放閱讀框59抗體包裝50MG
6-氧基-2-萘乙(標準品)英文名: Rifapentine17號染色體開放閱讀框39抗體包裝25g
6-硫鳥(標準品)英文名: Riluzole鈣敏感受體1抗體包裝5g
6-疏基(標準品)英文名: Riluzole鈣結(jié)合蛋白Calponin抗體包裝1g
7-基去乙酰氧基頭孢烷(7-ADCA)(標準品)英文名: Deferasirox2號染色體開放閱讀框44抗體包裝25ml
808猩紅(標準品)英文名: Deferasirox2號染色體開放閱讀框55抗體包裝5g
Acarbose(標準品)英文名: Risperidone2號染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg
Acyclovir(標準品)英文名: Risperidone2號染色體開放閱讀框29抗體包裝25g
Adiphenine HCl(標準品)英文名: Ritonavir3號染色體開放閱讀框21抗體包裝5g
Allylestrenol(標準品)英文名: Ritonavir1號染色體開放閱讀框74抗體包裝1g
alpha-亞麻(標準品)英文名: Rosiglitazone base補體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白10抗體包裝5g
Altrenogest(標準品)英文名: Rosiglitazone base1號染色體開放閱讀框93抗體包裝100g
Amisulpride(標準品)英文名: Rosiglitazone Maleate 1號染色體開放閱讀框94抗體包裝25g
Anastrozole(標準品)英文名: Rosiglitazone Maleate 1號染色體開放閱讀框96抗體包裝500g
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品血小板活化因子試劑盒羊藿苷;Icariin
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,培養(yǎng)級血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1試劑盒遠志;Polygalacic acid
不動桿菌Acinetobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品血纖肽/纖維蛋白肽B試劑盒隱丹參;Cryptotanshinon
谷氨酰胺酶(GLS)測試盒100管/96樣釀酒酵母 2--4-甲氧基嘧啶巨噬激蛋白Elisa
米根霉 2--5-甲基嘧啶加氧血紅-1Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 4,4-二氟庚二酸二乙酯21羥化Elisa
澳型核果褐腐病 鹽酸瓦地那三水合物21羥化Elisa
亞巴馬全緣孔 3,3-二甲基哌-2-酮肺表面活性蛋白Elisa
腐皮殼 3,5-二Elisa
食腺芽生葡萄孢酵母 1-萘肼鹽酸鹽循環(huán)腫瘤Elisa
根瘤 3-氟-4-嗎啉基苯基異酸酯四環(huán)類Elisa
細鏈格孢 N-甲基-2-戊骨膜蛋白Elisa
黃赭色鏈霉 2-萘鹽酸鹽磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD-3Elisa
大腸埃希氏 酸磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD-4Elisa
嘴突凸臍蠕孢 2-溴-3--5-硝基吡啶脫氧血紅蛋白Elisa
貝倫格葡萄座腔梨生專化型 乙酸鉍(III) (metals basis)氧合血紅蛋白Elisa
黃綠木霉 6-溴-1,2,3,4-四氫喹啉二型高密度脂蛋白Elisa
不產(chǎn)色鏈霉 N-苯基氨基乙酸乙基三型高密度脂蛋白Elisa