改良Gomori三色染色液

改良Gomori三色染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)試劑盒 Anti-NR1H3 Antibody磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體
豚鼠胃泌素抑制肽(GIP)試劑盒 Anti-NR1H4 Antibody磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體
豚鼠波形蛋白(VIM)試劑盒Anti-NR1I2 Antibody核糖核蛋白抗原抗體
豚鼠成纖維生長因子4(FGF4)試劑盒 Anti

產(chǎn)品分類：結(jié)締染色

儲(chǔ)存條件：4℃,避光,6個(gè)月

用途：又稱MGT染色液。肌肉活檢，肌纖維呈青綠色，膠原纖維呈亮綠色，細(xì)胞核呈紫色，線粒體呈紅色。

注意事項(xiàng)：新鮮材料盡快進(jìn)行冰凍切片。Gomori染色液應(yīng)冰箱內(nèi)存放，超過有效期建議丟棄以保證染色鮮亮。分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)染液配制時(shí)間適當(dāng)調(diào)整，時(shí)間越長，分化時(shí)間約短。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

土荊皮乙(標(biāo)準(zhǔn)品) 2'-Deoxyguanosine monohydrate透明質(zhì)合成3抗體包裝250mg

土壟大白蟻巢（標(biāo)準(zhǔn)品） 2'-Deoxycytidine;2'-dC熱休克蛋白56抗體包裝1g

土木香（標(biāo)準(zhǔn)品） 2'-Deoxycytidine;2'-dC熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體包裝5g

土木香內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品） 2'-Deoxyadenosine monohydrate熱休克蛋白相關(guān)蛋白4抗體包裝100g

土牛膝（標(biāo)準(zhǔn)品） DNA, Fishsperm透明質(zhì)合成2抗體包裝25g

兔耳草（標(biāo)準(zhǔn)品） DNA from salmon sperm 同源盒基因HOXA3蛋白抗體包裝5g

菟絲子（南方菟絲）（標(biāo)準(zhǔn)品） 5-Fluoro-2'-deoxycytidine同源盒基因HOXA4蛋白抗體包裝1g

蛻皮激（標(biāo)準(zhǔn)品） 5-Fluoro-2'--deoxyuridine同源盒基因HOXA6蛋白抗體包裝25g

脫落(標(biāo)準(zhǔn)品) Guanosine同源盒基因HOXA7蛋白抗體包裝5g

脫氫齒孔 Guanosine羥基類固(17β)脫氫4/17β-HSD4抗體包裝1g

脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿（標(biāo)準(zhǔn)品） GDP Disodium Salt血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體包裝100g

脫內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) SU-11274血紅結(jié)合蛋白1抗體包裝25g

脫內(nèi)酯琥珀半酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Uridine血紅蛋白α抗體包裝500g

脫羊藿(標(biāo)準(zhǔn)品) Uridine結(jié)合球蛋白β抗體包裝100g

脫氧熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品) UTP, Trisodium Salt海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體包裝25g

蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品免疫球蛋白重鏈可變區(qū)試劑盒遼東楤木皂苷Ⅹ;Araloside X

三隔鐮刀菌Gibberella│tricincta El-Gholl McRitchie Schoult. & Ridings 質(zhì)量規(guī)格：>99%免疫球蛋白重鏈試劑盒硫辛;Lipoic acid

鏈孢囊菌Streptosporangium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品免疫球蛋白輕鏈lambda試劑盒羅丹明B;Rhodamine B
改良Gomori三色染色液TIEG1/KLF(TGF-beta inducible early response gene 1)  TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗原規(guī)格： 0.5mg

TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I)  轉(zhuǎn)移生長因子–β受體1抗原規(guī)格： 0.5mg

Thioredoxin 1(ERdj5)  硫氧還蛋白抗原規(guī)格： 0.5mg

Tie1/JTK14 peptide  上皮生長因子樣域酪氨suan激mei1抗原規(guī)格： 0.5mg

Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2)  上皮生長因子樣域酪氨suan激mei2抗原規(guī)格： 0.5mg