YPD/YEPD培養(yǎng)基粉劑

YPD/YEPD培養(yǎng)基粉劑公司正在銷售的產(chǎn)品：兔孕相關(guān)內(nèi)膜蛋白(PAEP)試劑盒 Anti-CD81 Antibody鼠抗人前列腺特異性抗原單克隆抗體(檢測)
兔顆粒酶K(GZMK)試劑盒 Anti-CD81 Antibody抑制素/腫瘤抑制因子抗體
兔剪切修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)試劑盒 Anti-CD81 Antibody脂蛋白磷脂酶A2抗體
兔趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)試劑

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲存條件  4℃,12個月

用途  酵母常規(guī)生長的復(fù)合培養(yǎng)基

注意事項  主要由酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖組成,不含瓊脂。如要求無菌,可高壓滅菌。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

天冬酰胺內(nèi)肽(LGMN)LGMN ELISA Kit軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體包裝5g

天冬酰胺合成(ASNS)ASNS ELISA Kitβ-酪蛋白抗體包裝100g

天冬轉(zhuǎn)2(AST2)AST2 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框63抗體包裝25g

天冬轉(zhuǎn)(AST)AST ELISA Kit4號染色體開放閱讀框52抗體包裝1g

套膜蛋白(iNV)iNV ELISA Kit4號染色體開放閱讀框40抗體包裝5g

糖原磷化M(PYGM)PYGM ELISA KitCullin3抗體包裝1g

糖原磷化L(PYGL)PYGL ELISA Kit分裂周期同源蛋白40抗體包裝5g

糖原磷化B(PYGB)PYGB ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白106抗體包裝100g

糖原合激3α(GSK3α)GSK3α ELISA Kit染色質(zhì)修飾蛋白1A抗體包裝25g

糖皮質(zhì)激受體β(GRβ)GRβ ELISA Kit葉綠體伴侶蛋白抗體（蘋果）包裝100g

糖皮質(zhì)激受體α(GRα)GRα ELISA Kit分裂周期蛋白20B抗體包裝25g

糖抗原125(CA125)CA125 ELISA Kit周期調(diào)控蛋白D1抗體包裝100ml

碳酐Ⅸ(CA9)CA9 ELISA Kit周期蛋白B1結(jié)合蛋白1抗體包裝25ml

碳酐Ⅱ(CA2)CA2 ELISA Kit周期調(diào)控因子14A抗體包裝500ml

碳酐Ⅰ(CA1)CA1 ELISA Kit第七號染色體開放閱讀框12抗體包裝1g

膠紅酵母Rhodotorula│mucilaginosa 質(zhì)量規(guī)格：效價測定組蛋白H2b試劑盒澤瀉A-24-醋酯;Alisol A

白鱗蘑菇Agaricus│bernardii Quél. 質(zhì)量規(guī)格：>750ug /mg,USP,培養(yǎng)級組試劑盒棕櫚酯;Methyl hexadec

深海海旋菌Thalassospira│profundimaris 質(zhì)量規(guī)格：含量測定足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白試劑盒左旋千金藤啶堿;L-Stepholidi
YPD/YEPD培養(yǎng)基粉劑GFRA4/FITC  熒光標(biāo)記GDNF家族受體α-4IgG柏木酮

Melamine/Biotin  生物標(biāo)記兔抗三聚IgG位萘 99%

GHR /FITC  熒光標(biāo)記生長激受體IgG位萘 食品級,Kosher

Ghrelin/FITC  熒光標(biāo)記腦腸肽（一種新的生長激釋放肽）IgG 牛至油 FCC

GHRF/GHRH /FITC  熒光標(biāo)記生長激釋放激因IgG2-苯 硫代異酯 99%

GIP/FITC  熒光標(biāo)記胃泌抑制肽IgG2-苯 硫代異酯 99%,FG

TNFRSF18/FITC  熒光標(biāo)記糖皮質(zhì)激誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體IgG廣藿香油 食品級

GIG8/ID2/FITC  熒光標(biāo)記DNA結(jié)合抑制因子2IgG迷迭香油 FCC