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詳細(xì)介紹
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹：
測定意義脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質(zhì)氧化還原反應(yīng)的酶，催化底物通過細(xì)胞色素系統(tǒng)被氧化，釋放的能量供機(jī)體使用，是生物體取得能量的一種方式。測定原理在細(xì)胞呼吸過程中，氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在脫氫酶作用下接受氫以后，被還原為三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF呈現(xiàn)紅色，于485nm測定其吸光值，即得脫氫酶活性。自備實(shí)驗(yàn)儀器及用品天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、甲醇（不允許快遞，請用戶自備）。 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321357 |
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
密蘇里游動放線菌中心體肌動蛋白γ1/增強(qiáng)型PI3K蛋白抗體Human CPN2(Carboxypeptidase N2) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體Human CDKN1B(Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1B) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)免疫試劑盒
類干酪乳桿菌半胱蛋白-2抗體Human IL-17 F(Interleukin 17F) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒
管毛殼7號染色體開放閱讀框63抗體Human Cr(Creatinine) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)免疫試劑盒
鏈霉菌屬CD2結(jié)合蛋白3抗體Human TITF1(thyroid transcription factor 1) ELISA Kit人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒
淡紫紫霉膠原三股螺旋重復(fù)蛋白1抗體Human α-Endorphin(alpha Endorphin) ELISA Kit人胰島樣生長因子2受體(IGF-2R)免疫試劑盒
黃色直絲鏈霉菌20號染色體開放閱讀框72抗體Human TCEB2(Transcription elongation factor B polypeptide 2) ELISA Kit人胰島樣生長因子2(IGF-2)免疫試劑盒
黑木耳2號染色體開放閱讀框6抗體Human ACY1(aminoacylase-1) ELISA Kit人胰島樣生長因子2 mRNA結(jié)合蛋白2(IGF2BP2)免疫試劑盒
假單胞菌CD318抗體Human SAT1(Diamine acetyltransferase 1) ELISA Kit人胰島樣生長因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌著絲粒蛋白B抗體Human SH3BP2(SH3 Domain Binding Protein 2) ELISA Kit人胰島樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌1號染色體開放閱讀框111抗體Human IFNA2(Inteferon alpha 2a) ELISA Kit人胰島受體底物2(IRS-2)免疫試劑盒
Paraconiothyrium sp.19號染色體開放閱讀框80抗體Human NENF(Neudesin) ELISA Kit人胰島受體底物1(IRS1)免疫試劑盒
火木層孔菌半胱雙加氧1抗體Human SCUBE2(Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 2) ELISA Kit人胰島受體β(ISR-β)免疫試劑盒
異常漢遜酵母膠原蛋白11A2抗體Human beta 1-ARA(beta 1 adrenergic receptor autoantibody) ELISA Kit人胰島受體α(INSRA)免疫試劑盒
鍺栓孔菌 (淡黃褐栓菌)CUL4B蛋白抗體Human Wnt6(Protein Wnt-6) ELISA Kit人胰島降解(IDE)免疫試劑盒
德氏乳桿菌保加亞亞種1號染色體開放閱讀框103抗體Human NEXN(Nexilin) ELISA Kit人胰島(INS)免疫試劑盒
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRG蛋白偶聯(lián)膽汁受體1試劑盒2-金剛烷
葉點(diǎn)霉Phyllosticta│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRG蛋白偶聯(lián)雌激受體1試劑盒金剛烷
斯氏土地桿菌Pedobacter│steynii 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRG蛋白偶合受體44試劑盒己烯雌
脫氫酶(DHA)測試盒50管/48樣大腸埃希氏桿 2,5-二無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3aElisa
變金黃節(jié)桿 Boc-L-天冬-4-甲酯無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5aElisa
球孢白僵 10-(2-萘基)蒽-9-酸無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員6Elisa
煙色紅曲霉 三乙基硅烷五聚3Elisa
異型德克酵母 2,2-二甲基琥珀酸性T相關(guān)抗原4Elisa
鐮孢霉 氫西酞胱硫γ裂解Elisa
肉座屬 4-乙基-2,3-二氧-1-哌甲酰間粘附分子1Elisa
樟疫霉 碳酸鈉,一水色CElisa
弗雷德里克斯堡假單胞 2,4-雙(三氟甲基)苯甲色C氧化Elisa
谷棒桿 草酸鈷,二水色P450Elisa
阮繼生氏圣格奧爾根 甘羅溴色P4501A2Elisa
喜海水鹽單胞 3-膦酸基酸色P4502E1Elisa
門多薩假單胞 2-乙?；仆庑盘栒{(diào)節(jié)激Elisa
庫爾勒鹽單胞 α-萘周期AElisa
粘質(zhì)沙雷氏 2-乙酰-4-周期D1Elisa
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